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背景:MicroRNAs (miRNAs or miRs)是一类保守的由18-24个核苷酸组成的非编码蛋白的单链RNA。MiRNAs被看作是一类特殊的基因调节因子,通过在转录后水平调节基因的表达而在生物的组织器官发育、脂肪代谢、细胞分化、增殖和凋亡等过程中发挥重要作用。近年来陆续发现,一些miRNAs参与了人类乳腺癌的癌形成、癌演进以及转移过程。虽然已有较多研究报道各种miRNAs在人类癌症中的异常改变,但是它们的生物学功能还没有完全被人们所了解。目的:检测不同侵袭力人乳腺癌细胞株中miRNAs的表达情况,筛选出与乳腺癌细胞侵袭行为相关的miRNAs;初步探讨miR-340对乳腺癌细胞侵袭力的影响,预测miR-340的靶基因。方法:(1)应用miRNAs表达谱芯片检测低侵袭力人乳腺癌细胞株MCF-7和高侵袭力人乳腺癌细胞株MDA-MB-231中具有表达差异的miRNAs。(2)挑选具有显著表达差异的miR-340作为进一步研究对象,采用QRT-PCR方法验证其在高侵袭力人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231和MDA-MB-468)和低侵袭力人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达差异。(3)利用脂质体转染技术将化学合成的miR-340阻遏物(miR-340 inhibitors)转染至人乳腺癌细胞株MCF-7中,通过CCK-8法检测细胞转染前后增殖活性变化,用Transwell侵袭实验检测转染前后细胞侵袭力改变。(4)利用生物信息学手段,对miR-340进行靶基因预测。结果:(1) MiRNAs芯片结果显示,在二种不同侵袭力人乳腺癌细胞株中筛选获得112种差异表达的miRNAs。其中,有34种为显著差异表达的miRNAs。与MDA-MB-231细胞相比,在MCF-7细胞中表达显著上调的有hsa-miR-340、miR-335、miR-126等14个miRNAs,显著下调的有hsa-miR-186、hsa-miR-125b-1*等20个miRNAs。(2) QRT-PCR反应结果显示,与高侵袭力人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MDA-MB-468相比,miR-340在低侵袭力人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达显著上调(P<0.05)。(3)转染miR-340阻遏物后,乳腺癌细胞的侵袭能力较转染前明显增强(P<0.05),而体外增殖能力无明显变化(P>0.05)。(4)生物信息学手段预测结果显示,包括CTNNB,ZNF403,CCPG1等基因在内的数十种基因可能是miR-340的靶基因。结论:(1)不同侵袭力乳腺癌细胞株中存在多种miRNAs表达差异。(2) MiR-340对人乳腺癌细胞的侵袭力可能存在负性调控作用,癌细胞中miR-340活性受抑制,可使其侵袭力增强。(3) MiR-340可能通过某些靶基因发挥其对肿瘤发生发展的调控作用。