目的 建立一种标准化的大鼠视神经不同程度部分损伤动物模型，特别对致伤强度和损伤程度以及它们之间的关系进行量化分析，并探讨不同程度视神经损伤后视网膜节细胞和轴突的继发损伤变化和神经再生能力以及损伤后基因表达谱的变化。 方法 1．用压力恒定的反向镊和微型动脉夹夹持大鼠视神经建立不同程度视神经损伤的动物模型，用经颅荧光金逆行标记视网膜节细胞和电镜下轴突计数的方法衡量损伤程度，并用坚牢蓝心脏灌注的方法评价损伤模型中眼部血供的变化。 2．利用视网膜节细胞和轴突计数的方法以及节细胞和轴突的存活率和丢失率观察不同程度视神经损伤后的继发损伤反应，利用透射电镜和GAP-43免疫电镜技术以及神经特殊染色技术观察损伤后的再生反应，并基于银染技术用再生指数衡量不同程度视神经损伤后神经再生能力。 3．利用高密度基因芯片技术检测视神经部分损伤后视神经和视网膜基因表达谱的变化。 结果 1．视神经夹持损伤模型不会引起视网膜缺血。用致伤冲量和平均冲量能全面反映致伤强度，荧光金逆行标记视网膜节细胞计数或电镜 中国人民解放军总医院／军医进修学院博士学位论文下轴突计数是衡量损伤程度的良好指标，且节细胞计数要优于轴突计数。随着致伤强度的增加，节细胞和轴突的数目减少，视网膜节细胞的数目与致伤冲量之间呈幂函数曲线关系。 2．视神经部分损伤后视网膜节细胞和轴突在伤后两周内迅速丢失，其后因继发损伤继续缓慢丢失，总体呈指数形式下降，随着损伤程度的加重，节细胞和轴突的丢失越严重，轻度损伤时这种继发损伤具有自限性。 3．损伤区后可看到大量丛状聚集、区域化分布的无髓再生纤维，GAP43在损伤区前朗飞氏结处的轴突和损伤区后的细小无髓神经纤维中均有表达。 4．不同程度损伤后神经的再生能力可能不同，轻度损伤的再生能力强。 5．视神经损伤后有大量基因表达异常，包括细胞生长和存活、细胞骨架、细胞外基质和细胞粘附、自由基和氧化损伤、能量和代谢、炎症、神经传递和离子转运、细胞信号转导、结构蛋白、转录和翻译等有关的基因。结论 1．利用反向镊夹持的方法可以很简便地建立一种易于标准化的视神经部分损伤模型，该模型可以用冲量、平均冲量和视网膜节细胞计数的方法来评价。 2．不同程度视神经部分损伤后继发反应和再生能力不同，轻度损伤后的继发损伤具有自限性并具有更强的再生能力。 3．全面了解视神经损伤后基因表达的变化对于深入研究损伤后反应特别是再生反应的机制具有重要意义。