用于免疫分析的磁微粒的制备方法研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shiyigudan
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超顺磁性的磁微粒因具有磁选择性、灵敏度高等优点已广泛用于磁分离酶联免疫技术和磁微粒免疫层析技术等免疫分析领域。目前用于免疫分析的商品化磁微粒大多用合成高分子包裹后再进行表面修饰,磁微粒虽然均一性较好,但表面修饰过程复杂、活性基团易脱落,且在免疫分析应用中存在非特异吸附偏高、生物相容性较差等问题。本研究用牛血清白蛋白BSA代替合成高分子,直接包裹磁性纳米粒制备用于免疫分析的磁微粒,主要研究内容包括:1.采用化学交联法制备用于磁分离免疫分析的BSA包裹磁微粒。分别研究EDC和G484两种交联剂制备BSA包裹磁微粒的方法;建立磁分离化学发光免疫分析方法;对该磁微粒在磁分离免疫分析中的性能进行鉴定。2.采用高温变性法制备用于磁分离免疫分析的BSA包裹磁微粒。比较水浴加热和微波加热两种高温变性法的效果,并用磁分离化学发光免疫分析法鉴定该磁微粒的性能。3.以柠檬酸修饰的Fe3O4磁性纳米粒为原料,采用高温变性法制备BSA包裹的小粒径磁微粒,并用磁微粒免疫层析技术对其进行性能鉴定。主要研究结果为:①采用EDC化学交联法制备的磁微粒非特异性比较低,能成功得到小鼠IgG检测曲线,可用于磁分离免疫检测分析。②与化学交联法相比,高温变性法制备的磁微粒有更均一的粒径和更好的表面性质。通过TEM和FTIR表征、TG分析及pH和盐浓度对磁微粒分散性影响的比较得出:与水浴加热法相比,微波加热法中BSA包裹效果更好,磁微粒能成功用于IgG磁分离免疫检测分析。③Fe3O4与柠檬酸质量比为1∶2,溶液pH为4.0条件下能得到最优柠檬酸修饰的小粒径纳米粒,用微波加热法得到磁微粒后,偶联IgG,能成功用于磁微粒免疫层析技术。研究首次用微波加热的高温变性法成功得到了能够用于免疫分析的蛋白质包裹磁微粒,为用于免疫分析技术的磁微粒提供了一种简单的制备方法。
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