c-Myc是螺旋环螺旋-亮氨酸拉链（helix-loop-helix-leucine zipper,HLH-LZ）家族的转录因子,在细胞增殖等方面发挥着关键作用。本试验旨在构建绵羊c-Myc与EGFP融合基因的真核表达载体,并探讨c-Myc基因对细胞增殖相关基因表达的调控作用。本试验合成了绵羊c-Myc基因的编码区序列,并在后面添加柔性linker肽（G₄S）₃序列,构建了c-Myc-（G₄S）₃-EGFP融合基因的真核表达载体pc-Myc-EGFP并利用生物信息学分析了其结构和理化特征。转染后通过荧光定量PCR检测了其对绵羊胚胎成纤维细胞增殖相关基因表达的影响,并利用启动子分析软件解析了相应的表达调控机制。结果表明:（1）酶切鉴定和测序结果表明载体构建成功。（2）生物信息学分析表明绵羊c-Myc蛋白主要定位于细胞核,含有螺旋环螺旋（helix-loop-helix,HLH）结构域,其分子量为48 474.78 u,等电点为5.47,亲水性平均系数为-0.78,氨基酸序列与山羊、牛进化距离最近。融合蛋白c-Myc-（G₄S）₃-EGFP有较强的亲水性,且含有31个磷酸化位点。因（G₄S）₃的灵活度较高为9.848 5,两侧的目的蛋白c-Myc和EGFP都保持各自的空间构象且互不干扰。（3）进一步的细胞试验结果表明,重组质粒pc-Myc-EGFP在绵羊胚胎成纤维细胞能够表达。过表达c-Myc促进了绵羊胚胎成纤维细胞的增殖,使cyclin D2、Cdk4、Cdk6、E2F1、cyclin E1、cyclin A2、cdc25A m RNA的表达水平分别升高至5.20倍（P<0.01）、3.10倍（P<0.01）、6.54倍（P<0.01）、1.83倍（P<0.05）、6.52倍（P<0.01）、23.37倍（P<0.01）和8.22倍（P<0.01）。（4）生物信息学预测结果表明各基因的5′调控区存在c-Myc和E2F1的结合元件。综上所述,本试验成功构建了绵羊c-Myc与EGFP融合表达载体,其上调了细胞增殖相关基因的表达,相关机制可能是通过c-Myc直接作用于靶基因5′调控区的E-box元件,也可能是通过其他转录因子如E2F1的间接调控作用而实现。