【摘 要】
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目的:1、通过检测类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）患者和健康对照组粪便中菌群种类及分布情况,分析RA患者肠道菌群多样性及丰度的变化情况;2、分析RA组患者肠道菌群变化与其红细胞沉降率（Erythrocyte sedimentation rate,ESR）、C反应蛋白（C reaction protein,CRP）、类风湿因子（Rheumatoid factor,RF）
【基金项目】
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国家自然科学基金（编号:81871295）；
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目的:1、通过检测类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）患者和健康对照组粪便中菌群种类及分布情况,分析RA患者肠道菌群多样性及丰度的变化情况;2、分析RA组患者肠道菌群变化与其红细胞沉降率（Erythrocyte sedimentation rate,ESR）、C反应蛋白（C reaction protein,CRP）、类风湿因子（Rheumatoid factor,RF）、抗环瓜氨酸多肽抗体（Anti-cyclic citrullinated peptide antibodies,ACPA）、病程以及DAS28评分的相关性;3、分析RA患者肠道菌群与外周血细胞因子TNF-α、IL-6和IL-17A的相关性,进一步揭示肠道菌群变化与RA发病的联系,为临床治疗提供新思路。方法:收集2019年1月至2020年1月在山西医科大学第二医院住院的111例RA患者纳入RA组,所有患者诊断符合2009年ACR/EULAR修订的类风湿关节炎分类标准。选取山西省人民医院健康体检中心体检的100例健康人为健康对照组。所有志愿者BMI<28 kg/m2;年龄1880岁;近1个月内未服用抗生素或益生菌、益生元等微生态调节剂;近3个月未灌肠;无偏食、节食或其他饮食喜好。收集以上研究对象的年龄、性别、病程、ESR、CRP、RF和ACPA等临床参数。同时留取其外周静脉血和粪便,采用流式细胞术检测外周血细胞因子,基于16S rDNA高通量测序平台对111例RA患者粪便标本中的16S rDNA V3区进行分析,与100例健康成人粪便标本中菌群的多样性与丰度统计数据进行比较,使用mothur软件分析Alpha多样性,采用Mann-Whitney检验筛选差异菌群。使用Spearman相关性分析判断RA组患者肠道菌群变化与其临床参数和DAS28评分的相关性;同时分析RA患者肠道菌群与外周血细胞因子TNF-α、IL-6和IL-17A的相关性。结果:1.RA组和健康对照组间性别（χ2=0.005,P=0.947）、年龄（t=0.728,P=0.467）比较均无统计学意义。2.RA组样品显示物种丰富度的Chao1指数（Z=–2.188,P=0.029）和ACE指数（Z=–2.078,P=0.038）以及多样性指数Shannon指数（Z=–2.064,P=0.039）和Simpson指数（Z=–2.064,P=0.039）均低于健康对照组。3.在属水平上,RA组中Bifidobacterium（Z=–2.388,P=0.017）、Lactobacillus（Z=–2.543,P=0.011）、Clostridium sensu stricto（Z=–3.842,P<0.001）、Clostridium XI（Z=–2.682,P=0.007）、Turicibacter（Z=–2.437,P=0.015）、Phascolarctobacterium（Z=–3.524,P<0.001）、Megasphaera（Z=–2.870,P=0.004）、Veillonella（Z=–2.472,P=0.013）、Citrobacter（Z=–3.263,P=0.001）和Escherichia/Shigella（Z=–4.265,P<0.001）相对丰度较健康对照组明显增加,Butyricimonas（Z=–3.071,P=0.002）、Odorbacter（Z=–2.257,P=0.024）、Blautia（Z=–2.064,P=0.039）、Clostridium Xl Vb（Z=–2.901,P=0.004）、Lachnospiracea incertae sedis（Z=–2.159,P=0.031）、Acetivibrio（Z=–2.995,P=0.003）、Butyricicoccus（Z=–2.162,P=0.031）和Gemmiger（Z=–2.949,P=0.003）相对丰度较健康对照组有所减少。4.LEfSe分析示γ-变形菌纲（Gammaproteobacteria）和Lachnospiraceae在两组间差异最为显著（LDA值>±4）。5.高水平IL-17和高水平TNF-α患者比低水平患者的Prevotella相对丰度增加。结论:RA患者肠道微生态环境中细菌群落的多样性和丰富度与正常人群存在明显差异,外周炎性细胞因子高水平的患者粪便标本中Prevotella丰度增加,提示肠道菌群异常与RA中的炎症反应有关,肠道菌群失调可能参与RA的发生发展。
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