番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)Cd胁迫应答基因SlPLA2α的筛选与功能鉴定

来源 :哈尔滨师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rafezyp
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着人类的频繁活动及工厂污染物的排放,重金属污染问题日趋严重。镉(Cd)作为一种毒性极强的重金属广泛存在于自然环境中,它能够溶解于水体中,也能长时间残留于土壤中,并且不能被生物体降解,因而当植物吸收镉后,会通过食物链的积累,毒害动物及人体。番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)属于茄科(Solanaceae)植物,因其果实可以鲜食或加工而在各个国家和地区广泛种植,是重要的世界性蔬菜作物之一。番茄受重金属毒害后主要表现为植株矮小、发育缓慢、叶片黄化卷曲等。磷脂酶A2(PLA2)是一类能够催化水解磷脂质的酶,在细胞感受外界刺激及其信号传导过程中起着重要作用。目前,与动物中的研究相比,PLA2在植物中的研究报道相对较少,所以研究其具体的作用机制已成为近年来植物分子生物学中发展最迅速的领域之一。本试验以番茄磷脂酶基因SlPLA2α为研究对象,对该基因的表达模式和功能进行了分析,旨在为探究SlPLA2α基因参与番茄响应Cd胁迫应答的分子机制提供一定理论基础。本试验结果表明:(1)克隆获得SlPLA2α基因CDS区全长后,进一步通过生物信息学分析对SlPLA2α基因编码蛋白质的结构和功能进行预测分析。结果表明,该序列开放阅读框所翻译的蛋白质有156个氨基酸,主要由α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲及延伸链组成,推测该蛋白为非可溶性膜外蛋白,存在信号肽,具有苏氨酸磷酸化位点,启动子顺势作用元件预测分析表明该基因可能参与逆境胁迫反应。(2)利用实时荧光定量PCR技术,对SlPLA2α基因在番茄不同组织器官的表达特性及在不同处理条件下根和叶中的表达模式进行分析。结果表明,SlPLA2α基因在番茄不同组织中表达量差异显著;在不同处理下,SlPLA2α基因对CdCl2及2,4-表油菜素内酯(EBR)处理均能做出应答反应,并且随着处理条件的不同表达模式也发生变化。(3)将SlPLA2α基因构建到酵母表达载体PYES2上,转化酵母INVSC1感受态细胞中,比较非重组酵母及重组酵母在不同浓度CdCl2(5、10、15、20、25μmol/L)胁迫下的生存情况。结果表明SlPLA2α基因显著提高了酵母对CdCl2的耐受性。(4)将SlPLA2α基因构建到植物表达载体pCAMBIA2300上,运用根癌农杆菌介导的花序浸润法进行拟南芥遗传转化,获得6株PCR阳性植株,进一步通过RT-PCR鉴定技术表明该基因已在植株转录水平表达。对3个过表达SlPLA2α基因的拟南芥株系进行不同浓度的CdCl2(25、50、75μmol/L)胁迫处理,比较各株系的发芽率,从而分析转基因拟南芥耐Cd胁迫能力。结果表明,在不同浓度CdCl2胁迫下,3个转基因拟南芥株系的发芽率均高于野生型,且#4株系最为显著,说明转SlPLA2α基因拟南芥在种子萌发期提高了对Cd胁迫的耐受性。
其他文献
按照森林植被类型,对紫金山林区2007~2008年蝶类群落结构、时间动态及生态系统多样性等进行了研究,并对紫金山蝶类的历史和现状进行了对比分析。结果表明,紫金山现有蝶类8科56属9
目的分析对比突发性聋伴眩晕与前庭性偏头痛患者前庭功能的差异,为二者的康复治疗提供参考依据。方法分析2017年3月至2018年12月呼伦贝尔市人民医院耳鼻喉科眩晕门诊及住院的病人共80例患者的临床资料,其中突发性聋伴眩晕患者38例,前庭性偏头痛患者42例。所有患者均进行详细的病史询问及耳镜检查,然后行纯音测听、温度试验(caloric test,CT)、视频头脉冲试验(video head impu
随着市场经济的发展,地理标志证明商标的注册、使用、管理和保护,对提高特色农产品市场竞争力,推动农业产业结构调整,促进农民增收、农业增效、农村经济发展发挥了重要作用。
分析某纺织机械中端面圆柱凸轮的加工工艺,分别运用Pro/E和CAXA制造工程师软件对端面圆柱凸轮进行三维建模和数控编程,并最终在普通三坐标数控铣床上,加工出合格产品,取得良
舞台服装,源于生活服装,但又有别于生活服装,作为现代舞台美术重要组成部分的舞台服装设计,其中服装布料的选择尤其重要,服装设计师应根据剧情设计舞台服装,从质料、色彩、光
旅游社区文化建设对旅游消费发展至为重要。但是,在我国目前旅游消费的发展中,旅游社区文化建设仍没能引起人们足够的重视。本文从社区文化分析入手,强调了旅游社区文化建设在旅
针对往复走丝电火花线切割在大能量和大厚度切割过程中由于极间工作液供给不足以及蚀除产物难以及时排出导致加工效率难以得到提升的问题,本文提出了一种新型电极丝——绞合
目的:评估阿仑膦酸钠片对长期应用糖皮质激素的风湿病患者骨密度的影响。方法:收集2016年9月-2018年6月于我科住院的患有风湿性疾病的女性患者50例,患者均口服糖皮质激素6个月以上,随机分为维生素D+钙剂、维生素D+钙剂+阿仑膦酸钠片两组,给予相应治疗后并于第0、6个月监测骨密度指标。两组各因素差异比较采用单因素重复测量,组间治疗前后骨密度变化均值比较采用t检验,P<0.05认为有统计学意
建立了微波萃取一高效液相色谱测定土壤中多环芳烃组分的方法,详尽地叙述了土样预处理过程。当土壤样品取样量为10g时,在荧光检测器上响应的组分检出限为1-10ng/kg,在二极管阵列
目的:回顾表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)基因状态已知的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的临床病理特征及治疗方式,分