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目的 借助小鼠肾小球足细胞系(mouse podocyte clone 5,MPC5),观察嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)刺激足细胞及给予他克莫司(tacrolimus,FK506)和地塞米松(dexamethasone,DEX)干预后,足细胞分子瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 (transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)表达及分布的变化,探讨FK506和DEX对足细胞的保护作用及TRPC6与足细胞损伤修复的相关性.方法体外培养小鼠肾小球足细胞系(MPC5),设立对照组、PAN刺激组、FK506干预组和DEX干预组.对照组用含0.02％DMSO的RPMI 1640培养液培养；PAN刺激组加入PAN (50 μ g/ml)刺激MPC5,FK506干预组同时加入PAN(50 u g/ml)和FK506(10-6mol/L),DEX干预组同时加入PAN(50 μ g/ml)和DEX(10-6mol/L)干预,分别于药物处理后8h、24h和48h观察细胞形态并收集细胞,采用MTT法检测各组足细胞活性、流式细胞仪检测足细胞凋亡率,RT-PCR和Western blot分别检测TRPC6 mRNA和蛋白的表达,间接免疫荧光标记在共聚焦显微镜下观察TRPC6的分布.结果 (1)正常足细胞呈星形,胞体大并伸出树枝样突起,相邻细胞间形成相互连接.PAN刺激后足细胞胞体明显缩小(p＜0.05),出现足突回缩、消失,失去细胞间连接；足细胞活性24h及48h均较对照组明显降低(p＜0.05),而凋亡率24h及48h均较对照组明显升高(p＜0.05),8h时TRPC6 mRNA和蛋白的表达与对照组相比无明显差异(p＞0.05),24h和48h均显著升高(p＜0.01)；TRPC6的分布与对照组相比明显异常.(2) FKS06及DEX干预后细胞胞体明显大于PAN刺激组(p＜0.05),大部分足细胞维持正常的足突形态；FK506及DEX干预24h和48h足细胞活性均较PAN刺激组明显升高(p＜0.05),而凋亡率则均较PAN刺激组明显降低(p＜0.05)；FK506及DEX干预组8h时TRPC6 mRNA和蛋白的表达与PAN刺激组相比无明显差异(p＞0.05)；24h、48h时TRPC6 mRNA和蛋白的表达均较PAN刺激组明显降低(p＜0.05).TRPC6的分布与PAN刺激组相比明显改善,分布趋于正常.结论FK506、DEX可直接作用于足细胞,抑制PAN对足细胞结构的损伤,降低足细胞凋亡率,可能与FK506、DEX稳定足细胞分子TRPC6的表达和分布有关,从而维持裂孔隔膜(SD)结构和功能的完整性,发挥保护足细胞和抗蛋白尿的作用.