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玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）是由镰刀菌产生的一种广泛污染谷物及其制品的真菌毒素，对动物及人类具有生殖发育毒性、免疫毒性、诱发肿瘤及肝脏毒性等。目前已有的检测ZEN的方法有高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法、ELISA检测法等。ELISA检测法灵敏度高、操作简单、适用于检测大量样品，使用较为广泛。但是在ELISA检测中需要使用ZEN毒素标准品，该标准品价格昂贵且会对检测人员造成身体损害。本研究以自制的抗ZEN单克隆抗体7G5为配体，采用噬菌体展示技术首次淘选到ZEN的模拟表位，并建立了ZEN无毒ELISA方法。主要研究内容如下： 1、ZEN全抗原的合成。采用活泼酯法将ZEN半抗原与BSA及KLH蛋白偶联成ZEN全抗原，鉴定ZEN全抗原后免疫BALB／C雌性小鼠。 2、抗ZEN单克隆抗体的制备。将免疫后BALB／C小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2-0／Ag-14在PEG的作用下进行融合。采用间接ELISA和间接竞争ELISA的方法筛选阳性克隆，并用有限稀释法对阳性克隆进行克隆化。获得一株抗ZEN单克隆抗体7G5，该抗体对三种ZEN的结构类似物Zearalanone，α-Zearalanol，β-Zearalanol以及桔霉素（Citrinin），脱氧镰刀雪腐菌烯醇（Deoxynivalenol）的交叉反应率分别为3.8％，1.9％，23％，＜0.01％，＜0.01％。以该抗体建立的间接竞争ELISA标准曲线的最低检测下限为0.1ng／mL，线性范围为0.1ng／mL-100ng／mL，半量抑制浓度(IC50)为8ng／mL。 3、采用噬菌体展示技术淘选ZEN的模拟表位。以抗ZEN单克隆抗体7G5为配体，采用逐轮减少抗体包被浓度，交换使用封阻液中蛋白质种类的方法，在噬菌体七肽库中淘选ZEN的模拟表位，经三轮淘选后，随机挑取20个克隆测序，以间接ELISA和间接竞争ELISA确定阳性克隆。结果获得10种序列，间接竞争ELISA显示其中2种序列为ZEN的模拟表位。两种ZEN模拟表位的氨基酸序列分别为天冬氨酸-丙氨酸-缬氨酸-异亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸-蛋氨酸，组氨酸-组氨酸-