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目的通过细胞实验研究铁死亡诱导剂erastin和铁死亡抑制剂Fer-1对HTR-8/SVneo细胞活力以及相关基因和蛋白表达情况的影响,通过研究核转录因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)对于erastin诱导的HTR-8/SVneo细胞铁死亡过程的影响,探讨Nrf2对铁死亡的调控作用。方法选用人绒毛膜滋养层HTR-8/SVneo细胞株为实验对象。为了研究铁死亡诱导剂erastin和铁死亡抑制剂Fer-1对于HTR-8/SVneo细胞株的作用,将细胞分为对照(DMSO)组、Erastin作用组、Fer-1作用组、Erastin和Fer-1联合作用组。为了研究Nrf2对于erastin诱导的HTR-8/SVneo细胞株铁死亡过程的影响,应用Nrf2诱导剂丁基对苯二酚(tert-butyl hydroquinone,t BHQ),将细胞分为对照(DMSO)组、Erastin作用组、t BHQ作用组、Erastin和t BHQ联合作用组。按照分组分别给与各组HTR-8/SVneo细胞株相应药物处理。分别采用CCK-8法检测各组HTR-8/SVneo细胞株的存活率,应用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组HTR-8/SVneo细胞株内谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度变化,采用荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测各组HTR-8/SVneo细胞株内HOMX1基因和PRNP基因m RNA的表达水平,应用Western Blot法检测各组细胞内Nrf2蛋白表达情况。使用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果2.5m M、5m M、7.5m M、10m M erastin作用于HTR-8/SVneo细胞株均可以诱导HTR-8/SVneo细胞铁死亡,且呈剂量依赖方式,此过程可以被1mM铁死亡抑制剂Fer-1所阻断,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。5m M erastin处理组中的HTR-8/SVneo细胞内GSH水平显著降低,HOMX1 m RNA、PRNP m RNA以及Nrf2蛋白表达水平均显著升高,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,单独应用10mM、20mM、50mM t BHQ对于HTR-8/SVneo细胞株的细胞活力无明显影响。与5m M erastin作用组相比,分别用10mM、20mM、50mM t BHQ联合应用5m M erastin均可显著的抑制erastin诱导的HTR-8/SVneo细胞株铁死亡和细胞内GSH水平降低(P<0.05)。与对照组相比,50mM t BHQ组以及5m M erastin与50mM t BHQ共同作用组的HTR-8/SVneo细胞内的HOMX1 m RNA、PRNP m RNA以及Nrf2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论铁死亡诱导剂erastin可以诱导HTR-8/SVneo细胞铁死亡。t BHQ激活的Nrf2上调可以拮抗erastin诱导的HTR-8/SVneo细胞铁死亡和细胞内GSH耗竭,并引起下游HOMX1和PRNP基因m RNA的差异性表达。研究结果表明,Nrf2通过氧化应激通路可以有效抑制铁死亡,Nrf2通路在铁死亡过程中的保护作用可能为子痫前期的治疗提供新的思路。