论文部分内容阅读
本试验以146头中国荷斯坦奶牛为研究对象,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP分子标记方法对DGAT1基因和LOX-1基因的多态性进行了分析,并结合测序对其基因的3’端、5’端、外显子和内含子进行了序列分析,目的在于探索DGAT1、LOX-1基因对奶牛产奶性状的影响,为今后良种奶牛的选育提供一定的理论依据。研究结果如下:1. DGAT1基因3’UTR多态性及序列分析采用PCR-SSCP分子标记方法对中国荷斯坦奶牛DGAT1基因3’UTR进行了多态性分析,检测到KK型、MM型和KM型三种基因型,其频率分别为0.2931,0.0431,0.6638。测序结果显示,KK型和MM型都在11 992 bp处和11 993 bp处的GT变成CA,KK型在11 989 bp处的T变为G。2. DGAT1基因5’UTR多态性及序列分析在中国荷斯坦奶牛5’侧翼区,引物DGAT1P2扩增片段检测到AA、BB、AB三种基因型,其频率分别为0.1027,0.3904,0.5068。测序结果显示,AA型在3 272 bp处的T变为C,BB型在3 274 bp处插入了一个T碱基。3. DGAT1基因第8外显子多态性及序列分析在DGAT1基因第8外显子处,引物DGAT1P5扩增片段检测到KK、AA、KA三种基因型,其频率分别为0.1164,0.3562,0.5274。测序结果显示,KK型在10 433 bp～10 434 bp处的GC突变为AA,该突变为错义突变,导致赖氨酸被丙氨酸替代。4. LOX-1基因3’UTR多态性及序列分析在中国荷斯坦奶牛LOX-1基因3’UTR进行了多态性分析,检测到LOX-1基因3’UTR有AA型、BB型和AB型三种基因型,其频率分别为0.1374,0.3130,0.5496。测序结果显示,AA型在892 bp处的核苷酸C变为T,BB型在900 bp处的核苷酸T变为G。5. DGAT1基因和LOX-1基因的多态性与产奶性状之间的关系本试验将DGAT1基因和LOX-1基因作为影响中国荷斯坦奶牛产奶性状的候选基因进行研究,研究发现在DGAT1P1扩增片段中,不同基因型与中国荷斯坦奶牛的乳蛋白率和乳脂率有极显著和显著的相关性(P<0.01和P<0.05),MM型产奶量均显著高于KK型和KM型(P<0.05),基因型对SCS影响不大,没有达到显著水平;在DGAT1P2扩增片段中,不同基因型与中国荷斯坦奶牛乳脂率有显著的相关性(P<0.05),与乳蛋白率和产奶量(ME)相关性不显著;在DGAT1P5扩增片段中,中国荷斯坦奶牛KK型个体的乳脂率比AA型和KA型个体高,达到显著水平(P<0.05),基因型对乳蛋白率、产奶量和SCS影响不大,未达到显著水平;在LOXP1扩增片段中,不同基因型与中国荷斯坦奶牛的乳脂率之间有显著的相关性(P<0.05),对乳蛋白率、产奶量影响不大,没有达到显著水平。因此,DGAT1基因和LOX-1基因适合作为中国荷斯坦奶牛的标记辅助选择位点。