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目的:
建立一种基于表面增强拉曼的体液(斑)硫氰酸根(SCN-)现场快检技术,调查唾液SCN-含量与吸烟等的相关性,初步探索体液斑特征刻画的新途径。
方法:
1、通过调节盐浓度和pH,使Au@SiO2(纳米金胶)纳米微球适度聚集、均匀沉积到铝箔表面,自组装成固相SERS基底。以结晶紫、罗丹明6G为拉曼探针,评价基底的性能;
2、本实验采用的便携简智SSR-200SERS光谱分析仪,对样品拉曼光谱分析采用提高激光功率,延长扫描时间,增加平均次数,加大探头距离,扩大扫描范围的测量方法来达到相对定量;
3、采集健康成人的EDTA抗凝静脉血、尿液、唾液、精液样品,4℃储存,把体液、体液稀释液,或体液斑的浸洗液,用饱和NaCl盐析等方法进行预处理,用移液器取2~10μL滴加至做好的固相基底上,室温自然蒸发。至无可见液体时,用便携式拉曼光谱仪采集原始光谱数据。每个条件的实验和光谱采集均重复3次,数据取均值。原始光谱数据用LabSpec软件处理,OriginPro8.0统计分析作图;
结果:
1、通过控制Au@SiO2微球聚集、沉积制成的固相SERS基底,对结晶紫的增强因子可达到106;
2、最小二乘法进行相应的定量分析结晶紫标本,浓度在100-600nM,定量方程的R2为0.975,检测限约在5nM;
3、做成的固相基底基底内、批次内、批次间的光谱强度变异分别为10%、5%、8%。室温保存半年6个月性能无衰减;
4、最小二乘法进行相应的定量分析唾液斑标本,唾液斑硫氰酸根量方程的R2为0.98425。样本均值:190.09mg/Kg,吸烟组:239.8mg/Kg,不吸烟组:156.96mg/Kg。
结论:
用沉积法可经济、简单的大批量制作性能稳定的固相SERS基底,在现场拉曼快检中有较高应用价值。
初步证明了快速微转移的体液斑小分子拉曼光谱具有斑痕类型特异性,唾液斑的SCN-拉曼定量值与个体吸烟相关,有望发展成为嫌疑人排查的一项指标。
建立一种基于表面增强拉曼的体液(斑)硫氰酸根(SCN-)现场快检技术,调查唾液SCN-含量与吸烟等的相关性,初步探索体液斑特征刻画的新途径。
方法:
1、通过调节盐浓度和pH,使Au@SiO2(纳米金胶)纳米微球适度聚集、均匀沉积到铝箔表面,自组装成固相SERS基底。以结晶紫、罗丹明6G为拉曼探针,评价基底的性能;
2、本实验采用的便携简智SSR-200SERS光谱分析仪,对样品拉曼光谱分析采用提高激光功率,延长扫描时间,增加平均次数,加大探头距离,扩大扫描范围的测量方法来达到相对定量;
3、采集健康成人的EDTA抗凝静脉血、尿液、唾液、精液样品,4℃储存,把体液、体液稀释液,或体液斑的浸洗液,用饱和NaCl盐析等方法进行预处理,用移液器取2~10μL滴加至做好的固相基底上,室温自然蒸发。至无可见液体时,用便携式拉曼光谱仪采集原始光谱数据。每个条件的实验和光谱采集均重复3次,数据取均值。原始光谱数据用LabSpec软件处理,OriginPro8.0统计分析作图;
结果:
1、通过控制Au@SiO2微球聚集、沉积制成的固相SERS基底,对结晶紫的增强因子可达到106;
2、最小二乘法进行相应的定量分析结晶紫标本,浓度在100-600nM,定量方程的R2为0.975,检测限约在5nM;
3、做成的固相基底基底内、批次内、批次间的光谱强度变异分别为10%、5%、8%。室温保存半年6个月性能无衰减;
4、最小二乘法进行相应的定量分析唾液斑标本,唾液斑硫氰酸根量方程的R2为0.98425。样本均值:190.09mg/Kg,吸烟组:239.8mg/Kg,不吸烟组:156.96mg/Kg。
结论:
用沉积法可经济、简单的大批量制作性能稳定的固相SERS基底,在现场拉曼快检中有较高应用价值。
初步证明了快速微转移的体液斑小分子拉曼光谱具有斑痕类型特异性,唾液斑的SCN-拉曼定量值与个体吸烟相关,有望发展成为嫌疑人排查的一项指标。