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目的通过从广西圆斑蝰蛇蛇毒中分离纯化的NGF对可溶性Aβ25-35诱导的AD模型小鼠学习记忆能力的影响及其初步作用机制的研究,探讨蛇毒NGF在治疗阿尔茨海默病等神经退行性疾病方面的应用前景。方法小鼠进行侧脑室埋管后随机分为假手术组,AD模型组,阳性药对照组(吡拉西坦注射液,0.02mg·μl-1),NGFl组(0.2μg·μl-1),NGF2组(0.28μg·μl-1),NGF3组(0.4μg·μl-1),NGF4组(0.56μg·μl-1),NGF5组(0.8μg·μl-1).并设立正常对照组(各组均n=10)。采用Morris水迷宫及跳台行为实验,考察广西圆斑蝰蛇蛇毒NGF对Aβ25-35所致痴呆小鼠的学习记忆能力的作用。通过HE染色及尼氏染色法观察小鼠脑组织病理学改变,采用比色法检测小鼠脑组织胆碱能系统(AchE,Ach,ChAT)的变化与脑组织抗氧化指标(SOD,MDA,GSH,T-AOC)的变化,初步探讨广西圆斑蝰蛇蛇毒NGF对Aβ25-35诱导的AD模型小鼠的治疗作用机制。本实验选用吡拉西坦作为阳性药物。结果1 NGF对AD模型小鼠学习记忆能力的影响：在Morris水迷宫实验中,随着水迷宫训练天数的增加,各组小鼠(除NGF最高剂量组外)寻找水下平台潜伏期基本上逐渐缩短。在第7天的测试中,与空白对照组比较,假手术组小鼠穿越平台次数及目标象限活动时间无明显差别,而AD模型组小鼠明显减少,有统计学差别(P<0.05)。与AD组小鼠比较,NGFl,2组小鼠两项指标有所变化,但无统计学意义,NGF3,4组小鼠变化均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。跳台实验中,与正常对照组比较,模型组小鼠第6d跳下平台的潜伏期明显缩短(P<0.01),3 min内跳下平台的错误次数明显增多(P<0.01)；而假手术组小鼠无明显变化。与AD模型组小鼠相比,NGFl,2,3,4组小鼠两项指标变化均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。2 NGF对AD模型小鼠学习记忆能力改善作用机制：HE及Nissl染色检测发现,与正常对照组相比,模型组小鼠脑组织海马神经细胞线变得不清晰,细胞排列稀疏,正常细胞数目减少,假手术组无明显变化。NGF各剂量组中NGF4组与模型组相比,海马神经细胞数目变多,排列较整齐,细胞线比较清晰,NGF1,2,3组均无明显变化。与正常对照组比较,假手术组小鼠脑组织AchE,Ach,ChAT,SOD,MDA,GSH,T-AOC活性无明显区别,而模型组小鼠均有显著变化(P<0.01)。与模型组相比,各剂量组NGF小鼠脑组织各指标活性变化均与剂量变化呈正相关,其中NGF2组Ach, SOD,GSH活性变化具有统计学意义(P<0.05),NGF3,4组各指标变化均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),NGF5组Ach,SOD活性也有较显著变化(P<0.05或P<0.01)。结论浓度为0.4μg·μl-1及0.56μg·μl-1的广西圆斑蝰蛇蛇毒NGF对Aβ325-35诱导AD模型小鼠学习记忆能力有一定程度的改善作用,且其对Aβ25-35所致AD痴呆小鼠的学习记忆能力障碍的改善作用可能与修复模型小鼠脑组织海马部位的病理学损伤,胆碱能系统变化及抗氧化作用有关。