SFTS是由新布尼亚病毒(SFTSV)感染,由蜱叮咬而传播的一种新发急性传染病。该病典型的临床症状为严重发热、血小板和白细胞减少,死亡率较高。中国东北地势多山,生物资源丰富,地理复杂和气候多变造成物种的丰富和多样性,为蜱虫的生存和繁殖提供了生态和生物基础。该病近年来病例数逐年递增,对人群健康尤其是农民造成了巨大的威胁。但是该病目前主要靠流行病学数据分析、临床症状诊断和血液指标,容易受其他发热疾病和蜱传疾病的干扰而造成延误甚至是误诊。此外,对该病病原的起源与演化也缺乏基础性的研究。本研究对病人血液进行分子生物学检测,对阳性样本扩增新布尼亚病毒全序列,进行系统进化树分析。采集患者居住地分布的蜱虫进行病原分析。选取其中一个阳性样本为模板,扩增SFTSV-NP序列,通过大肠杆菌原核表达系统得到重组蛋白,通过SDS-PAGE和Western Blot方法来确定目的蛋白并对目的蛋白进行纯化。将纯化好的蛋白作为免疫原免疫实验动物新西兰大白兔得到多克隆抗体,经Western Blot鉴定和ELISA检测,证明该多克隆抗体是否具有免疫原性。实验的主要结果如下:(1)17名疑似SFTS患者经过分子生物学检测,其中5例确诊为SFTSV阳性。对SFTSV进行全基因组的序列测定,得到2个全基因组序列。在患者居住地及毗邻地区采集的蜱虫经SFTSV全基因组序列测定,得到2个完整序列,结果显示均为基因型A,从病人体内分离到的2株SFTSV与从蜱体内分离到的2株SFTSV的基因序列高度一致,验证了蜱虫为SFTSV的传播来源;(2)根据SFTSV-NP序列设计原核表达引物,扩增出738bp大小的片段。通过大肠杆菌原核表达系统得到重组蛋白,经实验验证后通过亲和层析分离技术对核蛋白进行纯化,经蛋白凝胶电泳和免疫印迹法验证得到大量高浓度、高纯度的蛋白;(3)将目的蛋白作为免疫原制备多克隆抗体,经ELISA和Western Blot实验验证,为该病的早期、快速诊断提供检测技术。本实验从分子生物学和血清学研究鉴定了SFTSV-NP的免疫原性,对新布尼亚病毒有了进一步的认识和了解,为商品化ELISA试剂盒的建立奠定基础;为进一步研究其致病机制和防治措施建立前期基础。