【摘 要】
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猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea,PEDV）引起的一种急性传染病,感染仔猪出现严重腹泻并伴有较高的死亡率,严重影响猪场生产效能和经济效益,且该病已对养猪业造成严重的负面影响。但是研究表明,除PEDV外,多种病原可导致仔猪腹泻,临床表现腹泻的仔猪常伴有混合感染的情况,这无疑给猪流行性腹泻的诊断和防治工作带来了巨大困难。为明确山东部分地区近年来PED
【基金项目】
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国家重点研发计划项目课题《规模化猪场科学合理免疫程序的研究》 （编号:2017YFD0500605）; 国家重点研发计划项目课题《猪伪狂犬病、猪瘟区域净化与根除及种猪场高致病性蓝耳病净化技术集成与示范》（编号:2018YFD0500800）; 山东省重点研发计划《非洲猪瘟防控关键技术研究与应用》 （编号:2020CXGC010801-04）
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猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea,PEDV）引起的一种急性传染病,感染仔猪出现严重腹泻并伴有较高的死亡率,严重影响猪场生产效能和经济效益,且该病已对养猪业造成严重的负面影响。但是研究表明,除PEDV外,多种病原可导致仔猪腹泻,临床表现腹泻的仔猪常伴有混合感染的情况,这无疑给猪流行性腹泻的诊断和防治工作带来了巨大困难。为明确山东部分地区近年来PEDV的感染状况及发病规律,我们于2019年9月至2021年4月对山东部分地区发生腹泻的猪场进行了调查分析,共搜集了176份猪腹泻临床病料,利用RT-PCR/PCR技术对包括PEDV在内的常见导致猪腹泻的病毒进行了检测,对PEDV阳性的典型病例进行了组织病理学和免疫组织化学检测。结果显示,这176份样品中腹泻病毒阳性率为47.73%（84/176）,其中PEDV单一感染的有66份,占比为37.5%,传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus,TGEV）单一感染的样品有12份（6.82%）,而单独由猪轮状病毒（Porcine rotavirus,Po RV）感染发病的仅有7份（3.98%）,其中发现一列由PEDV和TGEV的混合感染病例。研究表明山东省猪群发生腹泻主要以PEDV单独感染为主。从发病季节来看,山东省猪流行性腹泻的出现季节呈现不明显的趋势,一年四季均可发生,且发病日龄逐渐扩大。组织病理学检测发现,PEDV阳性病例的十二指肠和空肠肠绒毛萎缩、断裂、脱落,肠黏膜下层充血严重。免疫组织化学检测结果显示,PEDV大多存在于十二指肠和空肠的黏膜上皮。为了进一步研究PEDV流行毒株的遗传进化规律,本研究对获得的12株PEDV分离株的S基因进行全长序列测定及分析。结果显示,12株PEDV的S基因全长为4155nt～4164 nt,编码1385～1388个氨基酸。同源性分析结果表明,12株分离株相互之间的核苷酸同源性（97.2%～99.9%）和氨基酸同源性（95.9%～99.7%）较高;分离株与参考毒株之间的核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为93.0%～99.1%和90.9%～99.4%。其中与经典疫苗毒株CV777相比,核苷酸序列同源性为93.1%～93.9%,氨基酸同源性为91.2%～93.0%,说明目前山东省PEDV流行毒株与经典疫苗毒株的同源性较低。进一步分析显示,CV777疫苗株与本研究的12株分离株相比,均在59～62位存在连续4个氨基酸（QGVN）插入,在140位有一个天冬酰胺（N）的插入,在160位有一个甘氨酸（G）的缺失。对S蛋白进行抗原指数预测分析发现,CV777与12株分离株在20aa～280 aa处抗原性差别明显。此外,我们在疑似发生猪流行性腹泻的猪场采集2916份血液样品,通过酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assy,ELISA）进行抗体检测。结果显示,1513份样品为阳性,阳性率为51.89%,不同猪群的抗体阳性率差异较大,仔猪阳性率最高,为79.22%,然后依次为经产母猪（57.79%）和后备母猪（40.13%）,商品猪的阳性率最低,为19.57%。综上所述,本研究对山东部分地区PEDV的分子流行病学进行了系统的调查分析,并对部分猪群的PEDV血清抗体进行了检测。研究结果将进一步丰富PEDV的流行病学数据库,为该病的科学防控提供一定依据。
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