论文部分内容阅读
第一部分 帕金森病大鼠模型中去神经支配纹状体差异表达基因的筛选 帕金森病(Pakinson’s disease，PD)是一种较为常见的中枢神经系统变性疾病，多发于中老年人，在55岁以上人群中的患病率约为1％左右。其主要病理学改变是黑质致密带(SNc)的多巴胺能(dopaminergic，DA)神经元的进行性变性和丧失，导致黑质-纹状体通路功能障碍，从而出现相应的运动异常如震颤、强直等。PD的发病机制复杂，目前已发现线粒体损伤、氧化应激、环境因素、兴奋性毒性及遗传因素等多种复杂的细胞分子机制可能参与DA神经元变性，但导致变性的起因和细胞分子机制仍未完全得以阐明，从而使得PD的治疗研究长期以来停滞在对症治疗的阶段。如何保护残留的DA神经元，是PD研究的重要课题。以往研究表明，大脑受到损伤后，受损细胞的靶区分泌一些保护性因子，例如神经营养因子和细胞生长因子等表达上调，从而对残留的神经元的存活、突起生长、突触形成和神经回路的重建等起着促进作用；并可能激活处于静息期的前体细胞，促进其增殖、分化，参与损伤后的修复。纹状体是黑质DA能神经元投射的靶区，但迄今有关PD发病过程中纹状体内基因变化的研究报道很少。 目的：通过大规模筛选去DA神经元支配的大鼠PD模型纹状体差异表达的基因，探讨PD的发病机制。 方法：30只成年健康雌性SD大鼠，随机分为实验组与对照组，通过6-OHDA诱导去DA能神经元支配制备PD模型，经阿朴吗啡证实模型制作成功；5周后取纹状体抽提总RNA，利用基因芯片筛选实验组和对照组差异表达的克隆；并利用RT-PCR对其中部分差异表达的基因进行鉴定。 结果：共筛选出61个差异表达基因，主要为细胞骨架样蛋白、代谢酶类、离子通道蛋白、细胞粘附分子、促进存活或诱导凋亡的受体或信号通路分子及蛋白合成系统中的核糖体蛋白等。 结论：6-OHDA诱导去DA能神经元支配大鼠PD模型纹状体内多种分子发生了变化，提示该部位可能发生了一系列的级联反应，参与DA神经元变性死亡的过程。