益气摄血颗粒及其拆方对ITP气不摄血证模型的药效及机制研究

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研究背景原发免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是一种以血小板减少为主要特征,以皮肤或粘膜出血为主要临床表现的疾病。中医对ITP进一步细分为血热妄行、气不摄血、瘀血阻络、阴虚火旺四大证型,在该病的治疗上常根据患者的具体情况辨证施治。目前与ITP相关的药物研究,主要借助于单一的ITP疾病模型,如通过注射单/多克隆抗体或血小板建立的ITP疾病模型。ITP疾病模型简单有效,但存在诸多局限性,与之相比病证结合模型更适用于复杂的中药研究。此外,研究多为关于化学成分、临床疗效、作用机制等的整方研究,通过拆解方剂而开展的气血理论研究相对较少。本文即是在ITP气不摄血证模型的基础上开展的益气摄血颗粒及其拆方的研究,并试图探究气血之间的关系。1实验目的1.1益气摄血颗粒、补气药、养血药对ITP气不摄血证模型的影响。1.2 初步探究气不摄血证中气与血的关系。2实验方法2.1第一部分实验的方法将CBA/J小鼠随机分为正常组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组、醋酸泼尼松(PA)组。除正常组外,其余4组第1周睡眠剥夺,第2、3、4周睡眠剥夺及腹腔注射大鼠血小板。造模第一天开始,药物组分别灌胃低剂量益气摄血颗粒(15.0g生药/kg)、高剂量益气摄血颗粒(30.0g生药/kg)、醋酸泼尼松(0.75mg/kg)。每周检测血小板计数,第0、1、4、5周称量小鼠体质量,第5周拍摄小鼠舌象。2.2第二部分实验的方法将CBA/J小鼠随机分为正常组、模型组、益气摄血组、补气组、养血组、醋酸泼尼松(PA)组。除正常组外,其余5组第1周睡眠剥夺,第2、3、4周睡眠剥夺及腹腔注射大鼠血小板。造模第一天开始,药物组分别灌胃益气摄血颗粒(15.0g生药/kg)、补气药(5.7g生药/kg)、养血药(9.3g生药/kg)、醋酸泼尼松(0.75mg/kg)。检测体质量、抓力、自发运动、舌象、血小板计数、MPV、红细胞计数、血红蛋白测定、T细胞亚群、胸腺和脾脏指数。2.3第三部分实验的方法将Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、益气摄血组、补气组、养血组。除正常组外,其余4组第1周睡眠剥夺,第2、3周,除睡眠剥夺外每隔一天腹腔注射一次APS。给药方式同2.2。检测体质量、抓力、脉搏、血小板计数、MPV、红细胞计数、血红蛋白测定、T细胞亚群、Breg细胞、脾脏指数,观察肝、脾、腹腔主动脉血管的HE染色病理切片。3实验结果3.1第一部分实验的结果模型组小鼠舌色淡白,体质量、血小板计数较正常组显著下降(P<0.01)。药物组体质量与模型组无统计学差异,血小板计数较模型组明显上升(P<0.05),舌色略有恢复。3.2第二部分实验的结果模型组小鼠皮毛粗糙无光,精神萎靡,舌色淡白,体质量、抓力、运动路程、血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、Treg细胞较正常组均明显下降。益气摄血组抓力、血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、Treg细胞较模型组均明显上升。补气组抓力、血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定较模型组明显上升。养血组血小板计数、红细胞计数较模型组明显上升。3.3第三部分实验的结果模型组小鼠皮毛粗糙无光,精神萎靡,体质量、抓力、脉搏幅度、血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+较正常组明显降低,Breg细胞及脾脏指数明显升高。益气摄血组抓力、脉搏幅度、血小板计数较模型组明显升高,Breg细胞降低。补气组抓力、脉搏幅度、红细胞计数、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+明显升高,Breg细胞降低。养血组抓力、脉搏幅度、血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+明显升高,Breg细胞降低。4结论4.1 益气摄血颗粒及其拆方对ITP气虚证及血虚证均具有改善作用。4.2 拆方结果表明:两种组方的作用有相似性,但存在差异,有待进一步研究。
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