丙型病毒性肝炎是病毒性肝炎中一种重要的类型，在我国约3.2％的人口受到丙型肝炎病毒(hepatitisvirusC，HCV)感染，西方发达国家的感染率也高达0.5％到2％，全球感染率约3％(1.7亿)。感染HCV后50％到85％的患者会慢性化，大多数表现为慢性肝炎，估计约15—20％可进一步发展为肝硬化，甚至肝细胞癌，其危害性大。 目前检测丙肝病毒的方法有两类：一是检测HCV抗体，二是检测HCVRNA。由于检测RNA的实验室条件要求比较高，操作复杂，易产生假阳性反应，并且价格昂贵、对实验人员要求高等原因，限制了其在临床上的广泛应用。现在普遍使用的仍为检测HCV抗体的方法，其中以检测血清中HCV抗体的ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)法较为普遍，ELISA法主要的特点是操作简便，检测快速，但仍有不足之处，在感染后窗口期内不能测出，在低危人群中仍发现大量的不确定及假阳性结果。 蛋白质芯片是伴随着基因芯片发展起来的一项新技术，已开始应用于多个方面，如蛋白质与蛋白质的相互作用，蛋白质的亚细胞定位，蛋白质的功能等.蛋白质芯片已成功地应用于多种细胞因子、自身免疫性疾病、及过敏原等的检测。近年来也有学者开始应用蛋白芯片进行病原微生物的检测。 丙型肝炎主要通过输血、不洁注射等血液传播以及体液传播。近年来，随着对丙型肝炎病毒抗体和核酸检测的开展和普及以及加强对血源和输血的严格管理，输血后丙型肝炎已经大幅度减少，静脉吸毒等不洁注射行为已经成为目前我国丙型病毒性肝炎最主要的传播途径。在静脉吸毒人群(Intravenousdrugusers，IVDUs)中有较高的HCV感染率，国外报道在IVDUs中HCV感染率为30-95％。目前静脉吸毒人群中HCV感染者的研究主要集中在感染率、危险因素、吸毒时间等方面，而在不同的注射方式的静脉吸毒者中其血清HCVRNA随吸毒时间的变化未见有报道。 本课题对静脉吸毒人员及门诊非静脉吸毒人员感染HCV者进行研究，应用丙肝病毒分片段蛋白质芯片、ELISA及荧光定量RT-PCR三种不同方法检测静脉吸毒人员中HCV的抗体及RNA状况，并与非静脉吸毒HCV感染者进行比较，探讨三种检测方法检测HCV的差异及蛋白芯片技术的临床应用价值，注射方式对HCVRNA的影响以及静脉吸毒及非吸毒两种人群HCV感染者中HCV病原学差异。 研究对象：2005年1月在广东省某强制戒毒所的静脉吸毒人员89例，其中男性82例，女性7例，平均年龄30岁(20岁～47岁)，使用毒品期限平均2年(10天～12年)。非吸毒HCV感染者为在我院就诊的患者35例，其中男性29例，女性6例，平均年龄44岁(29岁～66岁)，均有输血、血浆史，无吸毒史。 结果1三种不同检测方法的检测结果：显示在总共124份血清中，ELISA检测HCV抗体阳性114例，RT-PCR检测HCVRNA阳性76例，而应用丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片检测阳性110例，阴性9例；不确定5例。(抗-C阳性2例，抗-NS3阳性2例，抗一NS4阳性1例)。 2蛋白芯片与HCVRNA检测结果比较76份HCVRNA阳性血清中，蛋白芯片检测阳性74份，阴性1份，不确定1份。在48份HCVRNA阴性的血清中蛋白芯片检测阳性36份，阴性8份，不确定4份。蛋白芯片与RT-PCR相比阳性符合率为97.37％。在蛋白芯片检测阴性的9份血清中，HCVRNA阳性1份，符合率为88.89％，在5份蛋白芯片检测结果不能确定的血清中，HCVRNA阳性1份。 检测结果中以抗-C+抗-NS3+抗-NS4+抗-NS5阳性组合的比例最高，为71.82％，而且在这种阳性组合中，其HCVRNA阳性率最高，为77.22％，与其他组比较有统计学差异(χ2=17.348，P=0.004)。 3蛋白芯片检测与HCVRNA定量的关系蛋白芯片检测各片段抗体阳性率与HCVRNA血清载量有相关性，检测出的片段抗体阳性数高，则血清HCVRNA载量高，以C、NS3、NS4、NS5四个片段抗体同为阳性时血清HCVRNA载量最高。 4蛋白芯片检测与抗-HCV检测结果比较114份抗-HCV阳性血清中，蛋白芯片检测阳性109份，阴性1份，不确定4份。在10份抗-HCV阴性的血清中蛋白芯片检测阳性1份，阴性8份，不确定1份。蛋白芯片与抗-HCV相比阳性符合率为95.62％。抗-HCV阴性的10份血清中，蛋白芯片检测阳性1份，符合率为90％，在5份蛋白芯片检测结果不能确定的血清中，抗-HCV阳性4份。比较显示蛋白芯片检测特异性高于抗-HCV检测。 5IVDUs和nIVDUsHCV感染者丙型肝炎分片段蛋白芯片检测结果比较在两组HCV感染者中，应用分片段蛋白芯片检测结果表明各个片段抗体在两组中分布无明显差异(χ2=7.048，P=0.531)，都以抗-C+抗-NS3+抗-NS4+抗-NS5抗体阳性组合阳性率最高。 6静脉吸毒人员中HCV感染状况和检测结果分别应用丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片、ELISA及荧光定量PCR进行检测，结果显示：在静脉吸毒人员中抗-HCV阳性79例(88.76％)，HCV-RNA阳性58(65.17％)，而应用丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片检测结果示：阳性77例，阴性9例，不确定3例。(抗-C阳性1例，抗-NS3阳性1，抗-NS4阳性1例)。 7共用注射器吸毒人员中吸毒时间与HCVRNA的关系在共用注射器吸毒的不同吸毒年限吸毒人员中，虽然以吸毒时间3-6年组及大于9年组阳性率最高，为100％，但统计学检验显示各组阳性率无显著性差异(χ2=4.711，P=0.194)。 8无共用注射器吸毒人员中吸毒时间与HCVRNA的关系在无共用注射器吸毒的不同吸毒年限吸毒人员中，以吸毒时间小于3年组阳性率最高，为69.44％(25/36)，统计学检验显示各组阳性率有显著性差异，吸毒时间越长则HCVRNA阳性率降低(χ2=8.695，P=0.034)。 9共用注射器吸毒人员中吸毒时间与HCVRNA血清定量的关系在共用注射器的不同吸毒年限吸毒人员中，虽然以吸毒时间大于9年组血清HCVRNA载量最高，达到1*104.8382copy/ml，但统计学检验显示各组阳性率无显著性差异(F=1.600，P=0.203)。 10无共用注射器吸毒人员中吸毒时间与HCVRNA血清定量的关系在无共用注射器的不同吸毒年限静脉吸毒人员中，虽然以吸毒时间大于9年组血清HCVRNA载量最高，但统计学检验显示各组阳性率无显著性差异(F=2.778，P=0.053)。 11无共用注射器吸毒人员中吸毒时间与抗-HCV关系在无共用注射器吸毒的不同吸毒年限吸毒人员中，以吸毒时间小于3年组阳性率最高，统计学检验显示各组阳性率无显著性差异(χ2=3.056，P=0.383)。 12非吸毒HCV感染者的检测结果：结果显示在35例门诊非吸毒HCV感染者中，抗-HCV阳性为35例，其中18例检测HCVRNA阳性，而应用丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片检测结果显示阳性33例，不确定2例。(抗-C阳性1例，抗-NS3阳性1例)。 13两组人员HCV感染者HCVRNA检测结果比较：静脉吸毒人员中HCV感染者中HCVRNA阳性率为73.417％(58/79)，高于门诊非吸毒HCV感染者中其阳性率为51.429％(18/35)，(χ2=5.277，P=0.022)。 而静脉吸毒人员中HCV感染者血清HCVRNA载量为1×103.10(copies/ml)，较门诊非吸毒HCV感染者血清HCVRNA载量(1×102.26(copies/ml))高，(t=1.986，P=0.049)。 结论1丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片检测其特异性高于ELISA法检测抗-HCV，其敏感性高于HCVRNA检测。 2丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片检测中，以抗-C(+)、抗-NS3(+)、抗-NS4(+)、抗-NS5(+)组合的阳性率最高。片段抗体数与血清HCVRNA呈正相关。 3静脉吸毒者中HCV感染率高，短时间吸毒仍有较高感染率。 4静脉吸毒人员共用注射器者血清HCVRNA与吸毒时间无相关性。无共用注射器者中吸毒时间短者血清HCVRNA阳性率高。 5静脉吸毒HCV感染者中血清HCVRNA阳性率较非吸毒HCV感染者血清HCVRNA阳性率高。静脉吸毒HCV感染者中血清HCVRNA载量较非吸毒HCV感染者血清HCVRNA载量高。