【摘 要】
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目的:1在学习古今医籍及医家应用中药三七经验的基础上,系统评价药物三七在肠腑病中的临床运用。2探讨血管生成相关蛋白之血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素（Ang-2）与血管生成的关系,验证药物三七具有抗血管生成的效用,从该角度出发为防治溃疡性结肠炎提供新思路。3运用网络药理学研究中药三七治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:1.1古代文献研究查阅与三七方药相关的古今典籍,同时参考古代医家基于肠腑病
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目的:1在学习古今医籍及医家应用中药三七经验的基础上,系统评价药物三七在肠腑病中的临床运用。2探讨血管生成相关蛋白之血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素（Ang-2）与血管生成的关系,验证药物三七具有抗血管生成的效用,从该角度出发为防治溃疡性结肠炎提供新思路。3运用网络药理学研究中药三七治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:1.1古代文献研究查阅与三七方药相关的古今典籍,同时参考古代医家基于肠腑病治疗常见方剂中三七方药的运用,进行相关的归纳总结。1.2现代文献研究检索关于中药三七在肠腑病中应用的相关文献:笔者以“UC”、“溃疡性结肠炎”、“炎症性肠病”、“三七”、“田七”等为关键词,检索万方数据库、中国期刊全文数据库、中国科技期刊全文数据库、Pubmed数据库自建库以来发表、收录的与肠腑病治疗相关的三七方药的文献。2选择清洁级雄性昆明小鼠,通过DSS自由饮用法可以初步构建溃疡性结肠炎小鼠模型,予美沙拉嗪缓释颗粒剂、健脾清热活血方、健脾清热活血去三七方及三七药液分别灌胃1周,观察记录UC小鼠一般情况、疾病活动指数（DAI）评分,取材后行苏木精-伊红染色法,观察组织病理学变化;进行免疫组织化学检查,检测小鼠的UC组织及正常结肠组织中血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素（Ang-2）的表达水平,进行数据整理。3.1通过TCMSP等中药化合物数据库结合文献挖掘获取三七的有效成分和作用靶点;结合Gene Cards、OMIM、DRUGBANK等数据库获取药物三七治疗溃疡性结肠炎的作用靶点。3.2以Cytoscape软件绘制“三七-成分-靶点”网络。借助Cytoscape软件和STRING数据库构建PPI网络以获得中药三七治疗溃疡性结肠炎核心作用靶点。3.3采用Metascape平台工具对三七治疗UC的靶点进行GO分析、KEGG通路分析等。结果:1小鼠的一般情况变化、疾病活动指数（DAI）评分与光镜下病理组织学提示制备溃疡性结肠炎模型成功。光镜提示模型组结肠黏膜表面出现缺损或脱落坏死,溃疡形成,隐窝结构消失、脓肿形成,固有层大量炎性细胞浸润,黏膜下层充血肿胀;治疗组较模型组有明显改善,见结肠黏膜尚完整,但存在黏膜缺损,隐窝脓肿,部分可见出血点,较多炎性细胞浸润固有层。与正常组相比,模型组、各治疗组病理组织学评分升高（P＜0.05）;与模型组相比,各治疗组的病理组织学评分降低（P＜0.05）,且各组病理组织学评分情况为:西药组＜中药全方组＜中药去三七组＜三七组。VEGF、Ang-2阳性率及相对表达量在正常小鼠、模型组及各药物干预组中存在差异。VEGF、Ang-2是血管生成的重要指标,棕黄色染色为阳性,VEGF、Ang-2在模型组、各药物干预组的组织中呈高水平表达,其阳性率明显高于正常结肠组织（P均＜0.05）;与模型组相比,各药物干预组的蛋白表达水平降低,可不同程度改善UC症状（P＜0.05）。结果提示各药物干预组的血管生成减少。2.1筛选得到中药三七化学成分8个,对应靶点190个,溃疡性结肠炎1924个,以及119个人参成分和疾病共同靶点。2.2 PPI网络中关键蛋白排名靠前的几个靶点为AKT1、JUN、TNF、PTGS2、CASP3。2.3获得GO、KEGG富集分析结果有1584个生物过程、142个分子功能、61个细胞组分及187条信号通路;KEGG分析三七治疗UC涉及主要靶点为IL1A、VEGFC、RB1、ANGPT1、ANGPT2等,调节的通路主要与PI3K-Akt、p53、NF-kappa B、VEGF等信号通路相关。结论:1中药三七能够一定程度改善DSS诱导的UC小鼠结肠损伤及炎症反应,这可能与其有效下调VEGF、Ang-2蛋白的表达,抑制病理性血管生成的作用机制有关,从而发挥预防及治疗UC的效用。2中药三七治疗UC可能VEGFC、ANGPT2等核心靶点密切相关,其作用机制与调控PI3K-Akt、p53、NF-kappa B、VEGF等信号通路有关。
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