重组人血管内皮抑制素联合姜黄素治疗小鼠肝癌(H22)皮下移植瘤的实验研究

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研究背景和目的:肝细胞性肝癌(HCC)是常见的恶性肿瘤,研究探索新颖有效的治疗药物或治疗方案仍是热门课题。重组人血管内皮抑制素(Endostar,恩度)具有广谱抗肿瘤血管生成活性,在肝癌临床治疗中的疗效得到认可。姜黄素具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抗血管生成等作用,其抗肝癌作用也有一些报道。然而,临床上很少使用单一药物治疗肿瘤,通常是采取联合方案以提高疗效。到目前为止,国内外仍未见恩度联合姜黄素治疗肝癌的研究报道。因此,本研究拟在小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型中开展恩度与姜黄素的联合用药,检测联合用药对小鼠H22肝癌皮下移植瘤生长的影响,并初步探讨其可能的作用机制,评价联合用药的抗肿瘤效果。方法:采用MTT比色法检测姜黄素对体外培养的H22细胞增殖的影响,流式细胞术检测姜黄素对H22细胞的凋亡诱导情况。通过建立小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型,观测各组(1、对照组;2、恩度组;3、姜黄素组;4、恩度联合姜黄素组)移植瘤的生长情况、免疫组化法检测肿瘤组织VEGF表达和微血管密度(MVD)、Western blotting分析VEGFR2(KDR/Flk-l)、死亡受体DR5以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平等。结果:实验结果表明,姜黄素能以时间和剂量依赖的方式抑制体外培养的小鼠肝癌H22细胞的生长增殖,且诱导H22细胞发生凋亡。与单药相比,恩度与姜黄素的联合用药能进一步抑制小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长、降低移植瘤组织VEGF的表达量以及减少移植瘤组织的血管新生。此外,恩度与姜黄素的联合用药能进一步抑制移植瘤组织VEGFR2(KDR/Flk-l)以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,同时增加死亡受体DR5的表达水平。结论:恩度与姜黄素的联合用药能协同抑制小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长,其作用机理与抑制肿瘤血管生成和诱导肿瘤细胞发生凋亡有关。结合本研究的初步实验结果,若能获得更多样本的动物实验和临床试验数据支持,恩度与姜黄素的联合用药方案有望成为肝癌靶向治疗中一种新的、有效的治疗选择。
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