【摘 要】
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[目的] 卵巢癌是女性生殖道肿瘤中病死率最高的疾病,采用目前的治疗方法,即使经过彻底的手术治疗和辅助化疗,晚期患者5年生存率仅为15%。研究卵巢癌相关的预测指标将有重要意
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[目的] 卵巢癌是女性生殖道肿瘤中病死率最高的疾病,采用目前的治疗方法,即使经过彻底的手术治疗和辅助化疗,晚期患者5年生存率仅为15%。研究卵巢癌相关的预测指标将有重要意义。鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)是多胺生物合成的限速酶,通过调节多胺含量影响细胞增殖分化,其活性增高与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法对卵巢良恶性肿瘤组织中的ODCmRNA以及相应蛋白表达进行检测,结合其临床病理学指标进行分析,旨在从转录和翻译水平初步探讨ODC基因在卵巢肿瘤发生、发展中的作用及其在卵巢癌诊断中的价值,并为临床卵巢癌基因治疗提供理论依据。 [材料与方法] 1.RT-PCR 随机选择卵巢癌32例,卵巢良性肿瘤26例,正常卵巢17例。按照Trizol试剂盒的说明提取组织中的总RNA,逆转录(RT)合成cDNA用作PCR的模板DNA,以β-actin基因作为内参照,使用特异性引物进行PCR。PCR产物行琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察电泳带,凝胶成像分析系统扫描拍照。 2.免疫组化检测卵巢良恶性肿瘤细胞中ODC蛋白的含量 由山东大学齐鲁医院病理科提供病理切片,卵巢癌31例,卵巢良性肿瘤20例,正常卵巢6例。采用SABC法,免疫组织化学染色结果判定在高倍镜下进行。阳性细胞比率≤10%记为(-),10%~30%记为(+),30%~60%记为(++),>60%记为(+++)。 [结果]所有卵巢标本中ODC mRNA的表达丰度均以均数±标准差表示。卵巢癌ODC mRNA表达量较正常卵巢显著升高,差异极显著(P<0.001),ODC基因表达在卵巢良恶性肿瘤之间及良性肿瘤、正常卵巢之间均存在显著性差异
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