增龄因素与压力侧牙周组织Wnt-1及护骨素的表达

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目的:通过建立不同年龄(幼年鼠、成年鼠)大鼠正畸牙移动模型,利用免疫组化及RT-PCR法检测比较幼年鼠和成年鼠在正畸牙移动过程中牙周组织骨保护素(OPG)及Wnt信号通路中的信号因子1(Wnt-1)的表达情况,研究增龄因素对鼠正畸牙牙周组织Wnt-1及OPG表达的影响,探讨增龄因素对正畸骨改建影响的分子机制。方法:采用Ni -Ti牵引弹簧建立大鼠上颌第一磨牙向正中移动的正畸牙移动模型,每天观察大鼠饮食等健康状况,检测正畸装置情况,有脱落的要立即重新安置,确保正畸模型建立成功。模型建立成功后,于牙齿移动1、3、7、14d分别取材,分离上颌牙槽骨,取上颌第一磨牙区牙及牙周组织标本。将80只wistar实验大鼠分为两组,即幼年组(6周龄)40只、成年组(24周龄)40只,每组取20只用于组织形态学研究, 20只用于RT-PCR测定。苏木素-伊红染色观察大鼠牙周组织的形态学变化,检测采用RT-PCR及免疫组化方法检测压力侧牙周组织中Wnt-1及OPG的表达。结果:①加力3 d组压力侧牙周膜腔变窄,靠近牙槽骨牙周膜内出现破骨细胞;加力7 d组压力侧牙周膜腔进一步变窄,牙槽骨边缘出现明显蚕蚀状骨吸收陷窝,即正畸后牙周组织形态发生变化,显示模型建立成功。②幼年组大鼠在牙齿移动1、3、7、14d时,压力侧OPG均有表达,但3、7d表达强于1、14d;成年组大鼠在1、3、7d有表达,3、7d时表达增强,但表达弱于幼年鼠。免疫组化结果与PCR结果基本一致。③幼年组及成年组大鼠Wnt-1mRNA均无表达,免疫组化Wnt-1仅在幼年鼠3天时有表达。结论:在正畸力作用下,OPG参与了正畸牙周组织改建的过程,OPG在压力区随正畸牙齿移动表达升高具有时间依赖性,这为正畸治疗上对牙齿移动速度及牙槽骨改建方面的控制,都提供了一个很好的切入点。压力侧OPG的表达与年龄关系密切,增龄因素所引起的牙周组织OPG表达的变化可能是导致成年正畸特点的分子机制之一;增龄因素是影响正畸骨改建的重要因素,Wnt-1与正畸骨改建的相关性需进一步研究确定,可以检测其它与成骨相关的因子如:Wnt-3a、Wnt-4、Wnt-5a,来进一步检测Wnt与正畸骨改建相关性。
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