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目的 汞是强神经毒物,牛磺酸和锌对脑发育有重要调节作用。本实验通过观测补充牛磺酸锌(TZC)对染Hg大鼠皮层和海马一氧化氮合酶(NOS)活力、神经元型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白和基因表达的影响,以及观察在体外培养皮层神经元时,TZC对染Hg大鼠神经元生长活力及突起长度的影响,研究TZC拮抗Hg对神经系统损害的机理。 方法 选用雄性健康(出生后21d)Wistar大鼠60只,体重(2004±20)g,随机分为对照组、染汞组、汞低牛磺酸锌组和汞高牛磺酸锌组;分别饮用蒸馏水,4.3mg/kg·d HgCl2饮水,4.3mg/kg·d HgCl2饮水和0.23 g/L TZC饮水,4.3mg/kg·d HgCl2饮水和0.46g/L TZC饮水,每组15只大鼠。喂养75天时,用Y-迷宫实验测试大鼠学习记忆能力;喂养90天时,用NADPH-d组织化学、nNOS免疫组织化学方法分别测定大鼠海马NOS活力、nNOS蛋白和基因表达。 成年雄性健康昆明系小鼠20只,体重(20±2.0)g,随机分为对照组、小剂量氯化汞组、更小剂量氯化汞组和小剂量氯化汞+牛磺酸锌组;每组5只,隔天一次对小鼠进行腹腔注射HgCl2(0.1mg/mL,0.05mg/mL),按10ml/kg体重注射:4小时后注射等剂量的TZC(100mg/mL)。10天后取小鼠脑组织,用RT-PCR测定nNOS的基因表达水平。 通过建立皮层神经元原代培养实验技术,观察不同浓度TZC(0.25×10-3mg/ml、0.5×10-3mg/ml、1.0×10-3mg/ml、2.0×10-3mg/ml、4.0×10-3mg/ml)和不同剂量HgCl2(8×10-6mg/ml、8×10-5mg/ml、8×10-4mg/ml、8×10-3mg/ml、8×10-2mg/ml)对培养皮层神经元生长活力及突起长度的影响。 结果 1.行为学测试结果 染汞75天后,与对照组大鼠相比,单纯染汞组大鼠Y-迷宫实验学会次数明显增多(P<0.05)。与单纯染汞组相比,给予高TZC干预的染汞组大鼠Y-迷宫实验学会次数明显减少(P<0.05)。