髁突颈骨折及髁突颈截骨后对髁突软骨生长发育影响的研究

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[目的]建立年轻SD大鼠单侧髁突颈截骨、骨折的动物模型,探讨应力改变对大鼠髁突生长发育的影响,为颌面部生长发育和髁突的生物学特性研究提供依据。[方法]用自制血管钳对4周龄雄性SD大鼠单侧髁突颈进行横向截骨,用眼科剪剪断髁突颈造成横向骨折。设立截骨组手术侧、截骨组非手术侧、骨折组手术侧、骨折组非手术侧及对照组,分别于术后1、3、5周分批处死SD大鼠,行髁突软骨超微结构观察。采用免疫组织化学检测与髁突生长发育关系密切的甲状旁腺激素相关蛋白(parathyroid hormone-related protein, PTHrP)、上游刺激因1(upstream stimulatory factor1, USF-1)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)及骨钙素(osteocalcin, OC)在髁突软骨中的表达变化。采用Western Blot(WB)检测PTHrP、USF-1蛋白在不同时间点截骨组手术侧、骨折组手术侧及对照组单侧髁突软骨细胞中的表达。[结果]单侧髁突颈截骨及单侧髁突颈骨折后,扫描电镜(Scanning electron microscope, SEM)结果显示:与对照组比较,手术侧髁突软骨表面波纹状结构紊乱,颗粒状物质减少,凝胶层破坏,深层胶原纤维暴露,截骨组手术侧不仅深层胶原纤维暴露,还出现胶原断裂、崩解。免疫组化和WB检测:在术后1、3周,截骨组手术侧和骨折组手术侧PTHrP及USF-1的表达均强于对照组;在术后5周,截骨组手术侧PTHrP及USF-1表达均强于对照组,骨折组手术侧PTHrP及USF-1表达均弱于对照组。免疫组化检测:在术后1、3周,截骨组手术侧和骨折组手术侧ALP及0C的表达均弱于对照组,在术后5周时截骨组手术侧和骨折组手术侧ALP及OC的表达均强于对照组。[结论]本研究的动物模型建立具备良好的可行性及可重复性。单侧髁突颈截骨及骨折后,致应力改变,造成髁突表面的超微结构改变,并影响PTHrP、USF-1、 ALP及OC在髁突软骨的表达,影响髁突软骨增殖、分化及软骨骨化,最终影响髁突的生长发育。
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