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第一部分lncRNA NORAD在食管鳞状细胞癌组织中表达及临床意义目的:检测长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DNA损伤激活的非编码RNA(non-coding RNA-activated by DNA damage,NORAD)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达状态,分析其表达水平与ESCC临床病理特征的关系。方法:收集2019年3月至2019年6月期间于河北医科大学第四医院胸外科行ESCC根治术患者手术切除的癌组织及相应癌旁组织标本30例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)方法检测30例ESCC组织及相对应癌旁组织中lncRNA NORAD表达水平,并通过统计学分析ESCC组织中lncRNA NORAD表达水平与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、组织学TNM分期等临床病理特征之间的关系。结果:lncRNA NORAD在ESCC组织中表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);lncRNA NORAD在TNM分期处于III-IV期、肿瘤分化程度处于低分化以及淋巴结转移阳性的ESCC患者组织中表达水平显著高于TNM分期处于I-II期、肿瘤分化程度处于中高分化以及淋巴结转移阴性者(P<0.05),而不同性别、年龄及饮酒史的ESCC患者组织中NORAD表达无显著差异(P>0.05)。结论:lncRNA NORAD在ESCC组织中呈高表达状态,其表达水平与肿瘤分化程度、淋巴结转移和组织学TNM分期具有显著相关性,而与患者年龄、性别、饮酒史无显著性相关性。第二部分lncRNA NORAD促进EC9706细胞迁移能力及机制研究目的:探讨lncRNA NORAD对食管鳞癌EC9706细胞增殖和迁移能力的影响及机制。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法检测lncRNA NORAD在不同ESCC细胞(TE1、YES-2、EC9706和KYSE150)中的表达水平,通过RNA干扰技术将lncRNA NORAD的小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)转染到EC9706细胞(si-NORAD组)以建立lncRNA NORAD低表达细胞,同时设置空白对照组(Con组,不转染任何序列)和阴性对照组(NC组,转染RNA干扰阴性对照序列),q RT-PCR验证转染效率。用MTT、平板克隆形成和划痕实验检测敲低lncRNA NORAD前后对EC9706细胞增殖和迁移能力的影响,Western blotting方法检测敲低lncRNA NORAD前后EC9706细胞中E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、N-钙黏连蛋白(N-cadherin)和锌指转录因子Snail的表达变化。结果:lncRNA NORAD在4种ESCC细胞中均存在表达;转染NORAD-si RNA后,EC9706细胞中lncRNA NORAD表达较Con组和NC组显著降低(P<0.01);si-NORAD组EC9706细胞的增殖和迁移能力较Con组和NC组显著降低(P<0.05);敲低lncRNA NORAD表达后,EC9706细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.01)而N-cadherin及Snail蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:lncRNA NORAD在ESCC细胞中均存在表达,敲低lncRNA NORAD表达可以抑制食管鳞癌EC9706细胞的增殖和迁移能力。lncRNA NORAD或可通过上调N-cadherin和Snail表达,同时下调E-cadherin表达诱导EC9706细胞上皮间质转化进而促进细胞恶性生物学行为。