IL-13和乙醇促进人肺成纤维细胞胶原表达

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ldkkkkk54
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:白细胞介素-13(Interleukine-13, IL-13)是调控肺纤维化的主要TH2细胞因子,IL-13与IL-13受体al(IL-13Rα1)、IL-4受体α(IL-4Rα)相结合产生促纤维化作用,IL-13受体α2(IL-13Rα2)以高亲和力结合IL-13并抑制IL-13的促纤维化作用。本实验检测乙醇对人肺成纤维细胞(HFL-1)增殖以及HFL-1细胞IL-13受体基因表达的影响,研究乙醇和1L-13对HFL-1细胞Ⅰ、Ⅲ胶原基因(COL1A1、COL3A1 mRNA)的表达以及胶原蛋白合成的影响,从分子水平和蛋白水平探讨乙醇对IL-13介导的肺纤维化的作用机制。方法:1.台盼蓝染色检测HFL-1细胞活性。2.HE染色观察HFL-1细胞形态。3.细胞代谢测定(MTT比色法)检测乙醇和/或IL-13刺激HFL-1细胞后的增殖:细胞分组:①空白组②IL-13组(10ng/ml、20ng/ml和50 ng/m1)③乙醇组(25 mM、50 mM、100 mM、200 mM、400 mM、800 mM、1600 mM)④乙醇(25 mM、50 mM、100 mM、200 mM)和IL-13 (10ng/ml、20 ng/ml和50 ng/m1)混合组4.采用实时荧光定量RT-PCR (Real time RT-PCR)分析IL-13 (10 ng/ml、20 ng/ml和50 ng/m1)和/或乙醇(25 mM.50 mM、100 mM、200 mM)对HFL-1细胞刺激前后各组IL-4Ra mRNA, IL-13Rα1 mRNA和IL-13Ra2 mRNA以及COL1A1、COL3A1 mRNA表达的影响。5.ELISA方法检测IL-13(10 ng/ml、20 ng/ml和50 ng/m1)和/或乙醇(25 mM、50 mM、100 mM、200 mM)对HFL-1细胞刺激前后各组细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白的表达的影响。结果:1.HFL-1细胞活性良好,低浓度乙醇(<200 mM)对HFL-1细胞无毒性作用。2.HE染色观察HFL-1细胞为长梭形,胞质被染成粉红色,胞核为椭圆形被染成蓝色。3.低浓度乙醇(<200 mM)不会影响HFL-1细胞的增殖,但与IL-13(10 ng/ml、20 ng/ml和50 ng/m1)共同刺激下对HFL-1细胞的增殖有显著的促进作用,IL-13(10 ng/ml、20 ng/m1和50 ng/m1)对HFL-1细胞有促增殖作用,且有浓度依赖性。4. Real time RT-PCR检测结果显示,低浓度乙醇(50 mM、100 mM、200 mM)刺激HFL-1细胞后IL-13Ral mRNA, IL-4Ra mRNA表达都显著增强,同时IL-13Rαt2 mRNA表达显著减弱。低浓度乙醇(25 mM、50 mM、100 mM、200 mM)刺激HFL-1细胞前后COL1A1 mRNA、COL3A1 mRNA并无表达差异,IL-13(10ng/ml、20 ng/ml、50 ng/ml)刺激HFL-1细胞COL1A1 mRNA、COL3A1 mRNA表达显著增强,IL-13(10 ng/ml、20 ng/ml、50 ng/ml)和200 mM乙醇共同刺激HFL-1细胞后比单独相应浓度IL-13刺激后COL1A1 mRNA、COL3A1 mRNA表达显著增强。5.ELISA检测结果显示:低浓度乙醇(25 mM、50 mM、100 mM和200 mM)刺激HFL-1细胞前后Ⅰ型胶原蛋白并无表达差异,IL-13(10 ng/m1、20 ng/m1、50ng/ml)和200 mM乙醇共同刺激HFL-1细胞后比单独相应浓度的IL-13刺激后Ⅰ型胶原蛋白表达显著增强。结论:1.低浓度乙醇不影响HFL-1细胞的增殖,但与IL-13共同刺激下将对HFL-1细胞的增殖有显著的促进作用。2.低浓度乙醇刺激HFL-1细胞对IL-13Rαl mRNA、IL-4RαmRNA的表达起着上调作用,下调IL-13Rα2 mRNA的表达。3.低浓度乙醇刺激HFL-1细胞后COL1A1 mRNA、COL3A1 mRNA的表达无影响。4.IL-13能促进HFL-1细胞的COL1A1 mRNA、COL3A1 mRNA的表达且有一定的浓度依赖性,IL-13和乙醇共同刺激HFL-1细胞可以显著上调COL1A1 mRNA、COL3A1mRNA和Ⅰ型胶原蛋白的表达。
其他文献
铬渣因所含Cr(Ⅵ)具有强氧化性而对环境造成严重污染.该文查阅了铬渣无害化治理和综合利用技术等文献,结合自养煤矸石砖生产工艺,提出利用自养煤矸石砖技术对铬渣进行无害化
MAD2是一种纺锤体组装检验点蛋白,其功能是检测染色体动粒与纺锤体微管的连接进而控制有丝分裂的运行。本课题组前期研究发现在模拟微重力条件下培养的人骨肉瘤细胞中MAD2升高
β-淀粉样蛋白(p-amyloid, Aβ)是老年斑(senile plaques, SPs)的主要成分,目前普遍认为Aβ的聚集是阿尔茨海默病(Alzheimers Disease, AD)发病的主要原因,大量聚集的Aβ具有神经毒性。近年来研究发现,作为人体必需微量元素之一的硒具有神经毒性保护作用。鉴于此,本研究通过一系列体外实验探讨了硒甲基半胱氨酸对Aβ1-42导致的神经干细胞(neural s
多糖具有提高免疫能力、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等生物学活性,对多糖的研究越来越受到人们的重视。本文选取一株自行筛选的放射形土壤杆菌,研究了其生产胞外多糖(ARPS)的发酵条件;并对该多糖进行了分离纯化、结构分析及硫酸酯化修饰,探讨了硫酸酯化衍生物抗氧化与抗肿瘤活性。主要取得以下成果: 1) 确定了放射形土壤杆菌适宜的培养基成分和发酵条件:蔗糖 45 g?L-1;酸水解酪蛋白 10 g?L-1;混合磷
纳米复合陶瓷材料的宏观力学性能与其微观结构有着密切的关系.近几年来对于纳米复合陶瓷的显微结构特征和力学性能等方面的研究工作已经取得了一定进展,但有关纳米复合材料力
为了适应电动汽车、混合电动汽车及大容量储能电池等对高功率锂离子电池的发展要求,人们对锂离子电池的功率密度以及能量密度都提出了更高的要求;故进一步提升锂离子电池能量
本文介绍了目前国内外延迟焦化工艺技术的发展情况,并着重对延迟焦化装置中焦炭塔反应压力、循环比、生焦周期、设备大型化、水力除焦技术和设备、焦化加热炉、自动化水平、