论文部分内容阅读
目的:运用RT-PCR及扫描电镜探讨新型的微型钛网(micro-TW,TW)支架材料诱导兔骨髓间充质干细胞(bone marrow stromalcells,BMSCs)成骨分化的能力,以期为骨缺损修复重建提供良好的支架材料。方法:采用全骨髓贴壁培养法以及percoll液密度梯度离心法相结合,成功分离培养兔骨髓间充质干细胞。通过成骨诱导分化及成脂诱导分化证明目的细胞具备多向分化能力,从而鉴定获得的细胞为兔骨髓间充质干细胞。取第三代细胞接种于六孔板中,实验组加入微型钛网支架+普通培养基,对照组加入成骨诱导培养基,空白组加入普通培养基,14d后应用RT-PCR检测细胞碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)mRNA的表达水平,以2^(-△△CT)法计算基因表达的相对比值,并通过扫描电镜观察细胞在微型钛网支架上的长入、粘附及形态。结果: RT-PCR检测出实验组碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)mRNA的表达稍高于对照组,明显高于空白组,表明微型钛网支架能充分诱导兔骨髓间充质干细胞成骨向分化。扫描电镜显示微型钛网支架内部细胞粘附良好,其形态为多角形或梭形,保持着干细胞的形态特征。结论:微型钛网支架材料可以成功诱导兔骨髓间充质干细胞成骨向分化,且分化能力显著,是骨缺损修复的较为理想支架材料。