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目的:检测有效氯68ppm、pH6.5、氧化还原电位825mV的Medilox离子水对微生物的杀菌效果及对HBsAg的灭活作用,进行对胃镜现场消毒试验,为其临床应用提供依据。
方法:配制107cfu/ml浓度的耐甲氧西林金葡菌、鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢菌悬液。用金黄色葡萄球菌进行中和剂鉴定试验,试验设平行6组,(1)第1组:吸取1.0ml试验菌悬液于试管内,置20℃±1℃水浴中5min后,再吸加4.0ml消毒剂于试管内,混匀。作用至预定时间,吸取此样液0.5ml加于含有4.5ml稀释液的试管中,混匀。吸取该样液1.0ml,接种于平皿中,做活菌培养计数。(2)第2组:吸取1.0ml试验菌悬液于试管内,置20℃±1℃水浴中5min后,再吸加4.0ml消毒剂于试管内,振荡混匀。作用至预定时间,吸取此样液0.5ml加于含4.5ml中和剂溶液管中,混匀,作用10min。吸取该样液1.0ml,接种于平皿中,做活菌培养计数。(3)第3组:吸取0.5ml试验菌悬液于试管内,置20℃±1℃水浴中5min后,加入4.5ml中和剂,作用10min。吸取样液1.0ml,分别接种于平皿中,做活菌培养计数。(4)第4组:吸取0.1ml试验菌悬液于试管内,置20℃±1℃水浴中5min后,加入4.9ml中和产物溶液(以0.4ml消毒剂加4.5ml中和剂,作用10min配制而成)于试管内,作用10min。吸取该样液1.0ml,分别接种于平皿中,做活菌培养计数。(5)第5组:吸取0.5ml试验菌悬液于试管内,置20℃±1℃水浴中5min后,加入4.5ml稀释液,作用10min,吸取该样液1.0ml,分别接种于平皿中,做活菌培养计数。(6)第6组:分别吸取稀释液、中和剂各1.0ml于同一无菌平皿内,倒入上述试验同批次的培养基25ml,培养观察。根据结果判断所选中和剂及其浓度是否合适。菌悬液杀菌试验:将0.5 ml菌悬液与4.5ml中性离子水混匀,充分振荡,作用至预定时间;吸取0.5 ml上述混合液加入含4.5ml中和剂的试管中,振敲混匀,中和作用10 min;取该液1.0 ml接种培养,作活菌计数,计算平均杀灭率,试验重复3次。采用悬液定量试验法进行乙肝表面抗原灭活实验,向1.0mlMedilox离子水中加20μg HbsAg,混匀,作用到预定时间,加入1.0ml中和剂,中和作用10 min,用ELISA法(试剂灵敏度为1.0ng/ml)检测HBsAg抗原性;同时按照上述试验设计各对照组。试验重复3次。结果以S/N的值<2.1为阴性,表示抗原性破坏合格。对胃镜消毒效果的检测:分别用浸有PBS、中和剂的无菌棉拭子对消毒前、后胃镜表面涂抹采样;从活检孔注入灭菌蒸馏水10ml,取灌洗液1ml分别加入对照管及含中和剂PBS管中,立即振打80次,采用倾注法以无菌操作取样液1ml接种平皿,温箱培养24h,计数菌落,计算杀菌率。物体表面和工作人员手的现场消毒试验,按《消毒技术规范》(2002年版)的方法进行。
结果:Medilox离子水对耐甲氧西林金葡菌、鲍曼不动杆菌、肺炎链球菌菌悬液,作用1min,杀灭率均达100.00%;Medilox离子水对枯草杆菌芽胞作用10min杀灭率达100.00%;在室温条件下,用Medilox中性离子水原液作用1min实验组的S/N值<2.1,2倍稀释的Medilox中性离子水作用5 min、10 min时,S/N值<2.1,4倍稀释的离子水作用10 min时仍不能灭活;消毒前从胃镜检出的细菌主要有甲型链球菌、奈瑟菌、肠杆菌、绿脓杆菌等条件致病菌。按常规方法清洗后,用Medilox中性离子水分别作用1 min时即可杀灭细菌;经3次重复实验,菌悬液不含小牛血清时,消毒剂作用1min,对金黄色葡萄球菌的杀灭率均达100.00%;当菌悬液分别含25%、50%小牛血清时,该消毒剂作用15分钟时,杀灭率分别为100.00%和99.98%;一般物体表面的现场消毒试验结果:消毒后细菌数均少于8 cfu/c㎡,杀灭对数>1,阴性对照组样本经培养均无菌生长。物体表面消毒后符合卫生学标准,也符合消毒标准;医务人员手消毒现场试验结果:对30人次现场检测,阳性对照菌落数范围为36~2530 cfu/手,试验样本菌落数范围为0~18 cfu/手,杀灭对数值范围为2.38~3.27,平均2.54。
结论:Medilox离子水具有快速、高效杀菌作用,且消毒后Medilox离子水还原成水,不污染环境,也避免了消毒后用自来水冲洗可能造成的再污染,可广泛应用于医院消毒。