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目的:本研究通过中、西医结合的方法,旨在探讨电针联合嗅细胞移对脊髓损伤大鼠轴突再生及走向的影响。
方法:采用挫伤加全横断的造模方法将72只SD成年大鼠造成T9脊髓损伤模型,后随机分成4组,每组各18只;A组模型组:仅造成脊髓损伤,不施加其他因素;B组OECs组,造模后7天后,在脊髓挫伤区边缘1mm的脊髓中线上注入的OECs悬液1ul,浓度:5×104/ul,深度:1.75mm、1.5mm、1.0mm、0.5mm;C组电针组:脊髓损伤后1天,行电针治疗。选取督脉加体穴,督脉取胸7-8和胸11-12棘间隙加腰阳关,体穴取双侧足三里、委中、三阴交。选用选30号一寸毫针,6805-Ⅰ型电针治疗仪,电针设正、负极,疏密波,频率0.8Hz,强度:0.3-0.6mA,持续30min,隔日一次,共治疗8周;D组电针+OECs组,造模后7天打开伤口施以嗅鞘细胞移植并给予电针治疗。各组动物于造模后4周和8周注射5%荧光金水溶液(Flurosecentgold FG)0.5ul进行逆行标记,标记后动物再存活7天。后进行荧光金逆行示踪观察以及动物行为学观察(BBB scores)。
结果:(1)BBB评分结果示术后第1天,模型组、OECs组、电针组、电针+OECs组组间比较无显著性差异,P>0.05;第1周各组间比较无显著性差异,P>0.05;第2周OECs组、电针组、电针+OECs组BBB评分显著性高于模型组,有统计学意义,P<0.05;从第3周开始,OECs组、电针组明显高于模型组,P<0.05,电针+OECs组高于模型组、OECs组、电针组三组,P<0.05,有显著性差异。(2)荧光金逆行示踪结果显示:术后4周、8周各组脊髓内均可观察到有FG阳性神经纤维再生;在脊髓损伤区,电针+OECs组脊髓损伤处可见大量的再生的FG标记阳性神经纤维,数量明显较其他3组增多,通过脊髓损伤区FG标记的阳性神经纤维数量多于其他3组,走行较其他三组规则。脊髓切片上观察FG标记的阳性神经元数量,电针+OECs组多于其他三组,比较有差异,有统计学意义P<0.05;其他三组较观察到的数量多于模型组,比较有差异,有统计学意义P<0.05;电针组与OECs组比较,两组FG标记的阳性神经元数量接近,比较无统计学意义P>0.05;术后4、8组,各组FG标记的阳性神经元数量相近,比较无统计学意义P>0.05。
结论:电针联合OECs移植治疗能够极大的促进脊髓损伤大鼠神经纤维的再生以及大鼠后肢功能的恢复,能够恢复神经传导通路,并对再生的神经纤维生长方法有定的引导性。本研究为治疗脊髓损伤的实验性研究提供了新的思路,并为临床治疗提供理论基础与实验依据。