稀土上转换发光纳米材料的制备及其对鼠伤寒沙门氏菌的分析检测

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稀土元素掺杂的上转换荧光纳米材料(Upconversion nanoparticles),特别是镧系元素掺杂的纳米晶体,具有长波长激发,短波长发射的特殊光学性质,即反斯托克斯发光现象,可以有效地避免自体荧光背景干扰且对生物组织几乎无损伤。稀土上转换发光纳米材料相比于传统发光材料具有更多的优势,其在生物分析上具有更大的应用前景。本文制备了NaYF4:Yb,Er/Mn和NaYF4:Yb,Tm/Mn纳米粒子,配合以激光诱导荧光、荧光能量转移、适配体识别等技术手段,构建了系列灵敏的、特异性的、稳定实用的方法用于食品安全检测领域中食源性致病菌鼠伤寒沙门氏菌的分析检测。  本研究主要内容包括:⑴通过水热法合成发光性能好,形貌均匀的红区发光NaYF4:Yb,Er/Mn上转换纳米棒。利用配体交换法对上转换纳米颗粒的表面进行改性,使其带有生物官能团且在水相中分散性良好,随后修饰鼠伤寒沙门氏菌适配体作为能量供体。最大吸收波长为664 nm的Au NRs作为体系的能量受体,两者构建基于LET原理的适配体生物传感器对鼠伤寒沙门氏菌进行测定。在最优条件下,检出限为22 cfu/mL。⑵合成高发光效率的近红外区发光NaYF4:Yb,Tm/Mn上转换纳米粒子,对其表面进行PAA修饰及生物偶联鼠伤寒沙门氏菌适配体作为能量供体,最大紫外吸收波长为780 nm的金纳米棒作为体系的能量受体,构建发光能量转移体系。利用适配体特异性识别高灵敏检测目标菌,检出限低至11cfu/mL。⑶将表面修饰后的NaYF4:Yb,Tm/Mn纳米粒子连接核酸适配体,Au NRs连接互补核酸适配体。通过核酸杂交使两者相连,建立LET体系,加入鼠伤寒沙门氏菌后由于核酸片段与靶物质的特异性结合,导致稀土上转换荧光纳米材料的发光恢复,实现了对鼠伤寒沙门氏菌的检测。线性检测范围为50-5×104cfu/mL,检出限为42cfu/mL。
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