捻转血矛线虫耐伊维菌素分离株P-gp-9及GluCI-gbr-2b基因多态性研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxc1990531
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绵羊胃肠道线虫对驱虫药的耐药性已成为全世界共同面临的问题,其中以捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)耐伊维菌素药物危害最严重。鉴于目前羊养殖业的生产实践中寄生虫病防控的需要,本论文以国际标准虫株作对照,对捻转血矛线虫本土分离株的P-gp-9基因和GluCl-gbr-2b基因进行了研究,以了解相关耐伊维菌素药物发生机理。结果如下:通过MEGA5.1生物学软件,对捻转血矛线虫GluCl-gbr-2b基因片段的序列进行比较分析,发现以国际标准敏感株Hc-S为对照,国际标准耐药株Hc-R与本土耐药分离株 WSHc-001、WSHc-003、WSHc-138 的 GluCl-gbr-2b 基因片段有 20 个碱基位点是共同突变点;然而以分离敏感株YCHc-022为对照时,Hc-R、WSHc-001、WSHc-003、WSHc-138的GluCl-gbr-2b基因片段仅在第422位碱基位点为共同突变点;表明捻转血矛线虫对伊维菌素的耐药性可能与GluCl-gbr-2b基因片段上的某个碱基位点的突变相关联,其核苷酸多态性有可能作为潜在的分子耐药性检测的标记。对P-gp-9基因中的一段ORF序列比较分析,结果发现,国际标准敏感株Hc-S与分离敏感株YCHc-022 P-gp-9基因的ORF序列完全一致;国际标准耐药株Hc-R与分离耐药株WSHc-001、WSHc-003、WSHc-138 P-gp-9基因的ORF序列也完全一致。而且,与敏感株相比,耐药株P-gp-9基因ORF核苷酸序列在第89位碱基由CCA突变为CTA,氨基酸由脯氨酸变为亮氨酸。同时,运用PCR-SSCP方法分析该片段的多态性,结果显示耐药虫株和敏感虫株明显分为两个基因型。因此,该方法可以被考虑用于捻转血矛线虫耐伊维菌素虫株的现场检测。
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