与游离酶相比，固定化酶具有很多优点，比如可以重复使用，操作稳定性提高，易与底物和产物分离，提纯工艺简单，产率高，产品质量好；可以装柱（塔），连续反应，适于自动化生产，节约劳动力；适合于多酶反应。本学位论文较系统地综述了固定化酶的方法、载体材料、磁性载体材料及国内外研究进展，由此设计和制备了壳聚糖和二氧化硅共同包被Fe₃O₄纳米粒子的磁性复合纳米载体，并将其用于脂肪酶的固定化。本学位论文主要包括以下实验内容：1.采用化学共沉淀法制备具有超顺磁性的Fe₃O₄磁性纳米粒子。粒子平均粒径在10～15nm的，饱和磁感应强度为70.8emu/g。使用表面活性剂油酸对磁性Fe₃O₄纳米粒子进行疏水性改性，有效地改善了磁性Fe₃O₄纳米粒子与非极性溶剂的相容性。2.将Fe₃O₄/油酸粒子先分散甲苯溶液中，然后再分散在醇水相中，利用甲苯与醇可以互溶的特性，使Fe₃O₄/油酸粒子均匀分散在醇水相中。然后使用溶胶凝胶法中的Stber法，利用正硅酸乙酯的水解缩聚反应生成SiO2，替代Fe₃O₄粒子表面的油酸，由此制备成Fe₃O₄/SiO₂磁性纳米粒子。该磁性复合纳米粒子的平均粒径为20～25nm，饱和磁感应强度为39.2emu/g，且无剩磁和矫顽力，具有超顺磁性。再使用离子凝胶法利用壳聚糖与聚阴离子化合物三聚磷酸钠之间的离子凝胶化作用形成离子交联网，来制备壳聚糖包被Fe₃O₄/SiO₂的磁性纳米粒子，该复合纳米粒子的饱和磁感应强度为30.1emu/g，无剩磁和矫顽力，具有超顺磁性。并对制备的磁性复合纳米粒子进行了X射线粉末衍射分析，结果表明以上对Fe₃O₄纳米磁性粒子进行的表面修饰没有引起Fe₃O₄纳米粒子晶体结构的相变化。3.以上述制备的磁性复合纳米粒子为载体采用戊二醛交联法对脂肪酶进行固定化，对固定化过程中的戊二醛浓度、固定化的pH值和固定化时间进行优化，同时研究了游离脂肪酶及固定化脂肪酶的最适pH值和最适温度，并对固定化脂肪酶的操作稳定性做了考察。结果表明，以此载体制备固定化酶的固定化的最佳条件为戊二醛浓度为8%、固定化时的pH=7.5、固定化时间10h。游离脂肪酶的最适pH值为7.5，固定化脂肪酶的最适pH值为7.0，同游离脂肪酶相比，固定化脂肪酶最适pH向酸性方向偏移了0.5。游离脂肪酶的最适温度为40℃，固定化脂肪酶的只是温度为50℃，脂肪酶固定化比游离脂肪酶的最适温度提高了10℃。当固定化酶重复使用7次后，其相对酶活力依然保持在50%左右，表明固定化酶具有很好的操作稳定性，壳聚糖包裹Fe₃O₄/SiO₂制得的磁性复合微球是固定化脂肪酶的良好载体。本论文还对藏药裸茎金腰的提取成分黄酮醇1对酪氨酸酶的抑制作用做了研究。结果表明，黄酮醇1对酪氨酸酶具有竞争性可逆抑制作用。双倒数作图可得最大反应速度Vm为20μmol/min，米氏常数Km为0.2mmol/L，抑制常数Ki为5μmol/L。