结核分枝杆菌快速检测方法的研究

来源 :同济医科大学 华中科技大学同济医学院 华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Gzliao1
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自二十世纪八十年代中期以来,随着HIV蔓延、耐药菌株产生,世界人口流动增强,结核病发病率、死亡率呈上升趋势,形势严峻,迫切需要建立一种快速、灵敏、准确、经济的结核分枝杆菌(MTB)检测方法.该实验包括三部分,即MTT方法建立,分离培养--MTT法检测抗酸分枝杆菌(AFB)与分离培养--增强化学发光法(ECL)检测MTB的研究.该文首次采用MTT法检测AFB,探讨了最佳反应条件;BCG与MTT孵育温度为37℃,孵育时间为4h,裂解MTT三苯基甲脂晶体时间为4h.MTT方法的灵敏度为10<7>/ml.该文随后部分研究AFB快速分离培养法.实验中以Middlebrook 7H9液体培养基为基础,加入选择性抗生素多粘菌素B、两性霉素B、头孢菌素C,终浓度分别为200U/ml、10μg/ml、5μm/ml.临床痰标本经0.5mol/L NaOH处理后接种于培养基中,每7天用MTT方法检测一次,直至出现阳性结果.从实验结果看出,该研究所建立的分离培养--ECL法检测MTB具有快速、灵敏、准确、经济特点,可作为MTB临床实验室诊断方法.
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