表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)技术是一种新兴的生化分析检测手段,具有灵敏度高、样品无需纯化、可以实施实时快速检测等优点,被广泛用于环境监测、医疗诊断、食品安全等领域。但是由于SPR技术对目标分子没有选择性,需要与专一性强的识别元件联用。分子印迹聚合物具有专一性强、稳定性好等优点,将分子印迹聚合物用于SPR传感器,可以定量地分析各类化学小分子,是传感器识别元件的最佳选择。传统的单分子印迹膜只能检测有机相中的模板分子,但是大部分模板分子是存在于水相环境中的。为了解决这一难题,本文合成了一种双层分子印迹薄膜,并将其与SPR传感器联用,用以检测水相环境中的多种激素模板分子。这一方法具有能够检测低浓度的模板分子,并且制备简单,检测快速,重复利用次数多。本论文的主要研究内容和结果如下:1.利用现场光聚合的方法合成了雌二醇双层分子印迹膜,运用原子力显微镜、扫描电镜、接触角仪等分析测试技术进行表征。并运用SPR传感装置对分子印迹膜进行检测,结果显示:此分子印迹膜能够检测低达2.5×10-13mol/L的雌二醇溶液,在2.5×10-13-2.5×10-9mol/L范围内,线性相关;选择与雌二醇目标分子结构相似的睾酮等五种类似物进行选择性实验,实验表明所合成的分子印迹膜有很好的选择专一性。选择性较好;可进行10次重复洗脱吸附过程;最后将此传感装置运用于检测海水实体环境中的雌二醇,检测效果较好。2.合成睾酮双层分子印迹膜,并将其作为识别元件应用于SPR传感器上检测睾酮。运用原子力显微镜、红外光谱、接触角仪等分析测试技术对所合成分子印迹膜进行表征。运用SPR传感装置对双层分子印迹膜进行检测,结果显示:此双层分子印迹膜能够检测低达10-12mol/L的睾酮溶液,在10-12-10-8 mol/L范围内,线性相关;选择与睾酮目标分子结构相似的黄体酮等五种物质作为类似物进行选择性洗脱吸附实验,实验表明所合成的印迹膜有很好的选择专一性;可进行7次重复洗脱吸附过程;最后将此传感装置运用于检测海水实体环境中的睾酮,检测效果较好。3.合成雌酮双层分子印迹膜并将其用于检测水相环境中的雌酮分子。运用SPR传感装置对双层分子印迹膜进行检测,结果显示:此双层分子印迹膜能够检测低达2.5×10-12mol/L的雌酮溶液,在2.5×10-12-2.5×10-8 mol/L范围内,线性相关;选择与雌酮目标分子结构相似的睾酮等五种物质作为类似物进行洗脱吸附实验,实验表明所合成的双层分子印迹膜具有很好的选择专一性;可以进行10次重复洗脱吸附过程;能够进行多次重复利用;最后将此传感装置运用于检测海水实体环境中的雌酮,检测效果较好。4.探索了双层分子印迹膜的机理。主要从两个方面进行研究,一个是每一层分子印迹膜的单体模板交联剂的比例对吸附效果的影响。外层的分子印迹膜在合成过程中所使用的交联剂较多,起到保护内层膜的目的。另一个是两层膜的厚度对吸附效果的影响,内层分子印迹膜的比例占绝大部分,主要利用内层分子印迹膜上的活性识别位点,内层比较厚,所含有的识别位点也比较多。外层分子印迹膜主要起保护的作用,所以外层的印迹膜厚度比较薄。