侵入性胎盘是产科极为严重的并发症,导致产后出血、子宫破裂、子宫切除、甚至孕产妇死亡。近年来剖宫产率不断上升,非意愿人工流产率居高不下,子宫肌瘤切除等手术的开展,增加了子宫内膜损伤的机会。随着“二胎”政策的放开,使得妊娠伴瘢痕子宫的孕妇越来越多,侵入性胎盘的发生率也随之增高,给产科医生带来极大挑战。本研究通过免疫组化和SYBR Green PCR方法检测骨桥蛋白(osteoponin,OPN)及受体整合素(αv、β3)(integrinαv、integrinβ3)、E钙黏蛋白(E-Cadherin,E-cad)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在侵入性胎盘组织和正常胎盘组织的表达差异,探讨以上5个因子在侵入性胎盘发病机制的作用。同时应用光学显微镜及电子显微镜对侵入性胎盘和正常胎盘组织的形态进行观察。选择晚孕期发生侵入性胎盘孕妇胎盘组织34例(包括粘连性胎盘26例,植入性胎盘8例)作为研究组,晚孕期正常妊娠孕妇34例作为对照组。采用免疫组织化学En Vision二步法检测两组胎盘组织中OPN、整合素(αv、β3)、E-cad、MMP-9的蛋白表达水平。采用SYBR Green PCR方法检测所有标本中OPN、整合素(αv、β3)、E-cad、MMP-9的m RNA表达水平。常规HE染色和电镜制片,用于侵入性胎盘及正常胎盘形态学变化的观察。经过免疫组织化学En Vision二步法检测:(1)OPN在对照组和研究组胎盘组织中表达的阳性率分别为35.29%、61.77%。研究组胎盘组织中OPN蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P=0.029,P<0.05)。(2)整合素αv蛋白在研究组胎盘组织中表达的强阳性率分别为29.41%、76.47%。研究组胎盘组织中整合素αv蛋白表达高于对照组,差异有统计学意义(P=0.000,P<0.01)。(3)整合素β3在对照组和研究组胎盘组织中表达的阳性率分别为41.18%、17.65%。研究组胎盘组织中整合素β3表达低于对照组,差异有统计学意义(P=0.033,P<0.05)。(4)E-Cad蛋白在研究组胎盘组织中表达的强阳性率分别为35.29%、13.33%。研究组胎盘组织中E-Cad蛋白表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P=0.022,P<0.05)。(5)MMP-9蛋白在对照组和研究组胎盘组织表达的阳性率分别为14.71%、47.06%。研究组胎盘组织细胞中MMP-9蛋白表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P=0.004,P<0.01)。免疫组化结果显示,研究组中OPN、整合素αv、MMP-9较对照组蛋白表达增强,研究组中整合素β3、E-Cad较对照组蛋白表达降低。经SYBR Green PCR方法检测分析可知:(1)研究组胎盘组织中OPN m RNA含量是对照组的1.57倍,OPN m RNA在研究组胎盘组织中表达上调57%;(2)研究组胎盘组织中整合素αv m RNA含量是对照组的1.42倍,整合素αv m RNA在研究组胎盘组织中表达上调42%;(3)研究组胎盘组织中整合素β3 m RNA含量是对照组的0.60倍,整合素β3 m RNA在研究组胎盘组织中表达下调40%;(4)研究组胎盘组织中E-Cad m RNA含量是对照组的0.45倍,E-Cad m RNA在研究组胎盘组织中表达下调55%;(5)研究组胎盘组织中MMP-9 m RNA含量是对照组的1.20倍,MMP-9 m RNA在研究组胎盘组织中表达上调20%。SYBR Green PCR结果显示研究组中OPN、整合素αv、MMP-9m RNA表达上调,OPN m RNA上调幅度最大;研究组中整合素β3和E-Cad m RNA表达下调,E-Cad m RNA下调幅度最大。将研究组中OPN、整合素αv、整合素β3、E-Cad、MMP-9免疫组化结果作Pearson相关性分析得知:OPN与E-Cad在侵入性胎盘中的表达呈负相关(r=-0.313,P=0.009)。OPN与整合素αv、OPN与整合素β3、OPN与MMP-9、整合素αv与整合素β3、整合素αv与E-Cad、整合素αv与MMP-9、整合素β3与E-Cad、整合素β3与MMP-9、E-Cad与MMP-9的表达均无相关性(P>0.05)。在光学显微镜和电子显微镜下观察侵入性胎盘的形态变化如下。光镜下可见,正常胎盘蜕膜层完好,胎盘滋养细胞浸润深度在蜕膜层及子宫肌层内1/3。侵入性胎盘蜕膜层减少甚至消失,胎盘绒毛滋养细胞侵入子宫肌层,子宫肌纤维变性、断裂、分离,排列紊乱,失去正常结构,平滑肌细胞呈条簇状或团状分布。胎盘组织中微小新生血管增多,排列杂乱。电镜下可见正常胎盘组织滋养细胞表面绒毛呈规则的放射状排列。侵入性胎盘滋养细胞表面绒毛增多,形态紊乱,排列无序。侵入性胎盘合体滋养细胞表面绒毛增厚,深入子宫蜕膜基底层,到达肌层,与子宫形成紧密连接。本研究通过免疫组织化学方法和SYBR Green PCR方法对OPN、整合素αv、整合素β3、E-Cad、MMP-9在侵入性胎盘组和正常对照组胎盘组织中蛋白和m RNA水平表达检测发现:OPN、整合素αv、整合素β3、E-cad、MMP-9在侵入性胎盘和正常胎盘组织中的均有表达,OPN、整合素αv、MMP-9在侵入性胎盘组织中表达上调,整合素β3、E-cad在侵入性胎盘组中的表达下调,说明上述因子共同参与胎盘滋养细胞的侵袭活动,可能与侵入性胎盘疾病的发生有关。其中OPN m RNA在侵入性胎盘组织表达上调幅度最大,E-Cad m RNA在侵入性胎盘组织中表达下调幅度最大,且OPN与E-Cad呈负相关,推测进一步研究OPN与E-Cad的关系,可能对侵入性胎盘的成因及临床预测提供依据。