背景及目的胰腺癌是恶性程度极高、预后极差的肿瘤,五年生存率仅为9%。而胰腺癌患者容易对吉西他滨产生耐药,是预后差的主要原因之一。因此,就胰腺癌化疗耐药机制开展研究具有重要意义。GDF15是TGFβ超家族中的一员,既往相关的研究主要集中在胃癌、结直肠癌等多领域,但在胰腺癌中的作用尚不清楚,有关化疗耐药的研究也鲜与吉西他滨相关。本课题组前期工作发现吉西他滨诱导的胰腺癌PDTX模型中GDF15表达水平升高,提示GDF15可能在胰腺癌化疗耐药中具有重要作用。因此,本研究拟从细胞水平,研究GDF15对胰腺癌细胞增殖、迁移、EMT及化疗敏感性的影响,并初步探索GDF15介导胰腺癌吉西他滨化疗耐药的具体机制。为GDF15成为逆转胰腺癌吉西他滨化疗耐药的新靶点提供理论依据。方法通过对生物信息数据库的分析,探究GDF15在人胰腺癌组织中的表达水平、预后情况等生物信息学数据。利用RT-PCR技术对胰腺癌细胞系进行GDF15表达水平检测,选择合适的胰腺癌细胞系进行研究。利用RT-PCR技术检测在吉西他滨治疗中GDF15表达水平是否存在与治疗时间和药物浓度有关的梯度依赖性。通过慢病毒转染获得GDF15敲低/过表达的稳转株细胞,通过CCK8、Transwell等方法,观察干扰GDF15的表达水平对胰腺癌细胞的增殖、迁移以及化疗敏感性的调控影响。通过Western Blot,观察GDF15的表达对胰腺癌细胞的EMT是否存在调控作用,并初步探索GDF15介导EMT改变的可能信号通路,以期证明GDF15对胰腺癌细胞系的化疗耐药是否存在相关作用。结果生物信息学分析发现,GDF15在多种肿瘤中均有表达,且多与预后不良相关,在胰腺癌中,通过GEO数据库分析,发现高表达GDF15与胰腺癌总生存率较差呈现相关性。在细胞水平,敲低GDF15使得胰腺癌细胞的增殖、迁移等均有明显减弱,过表达GDF15使得胰腺癌细胞系的增殖、迁移等均有明显增强。对胰腺癌细胞使用吉西他滨干扰后,GDF15表达水平提高,并具有时间和药物浓度梯度依赖性,敲低GDF15可以提高细胞对吉西他滨的敏感性,过表达GDF15则会降低敏感性。干扰胰腺癌细胞的GDF15表达水平,Smad2/3、p-NF-κB、β-catenin、N-cadherin等蛋白表达也相应的同向改变。结论生物信息学发现GDF15在胰腺癌中具有潜在的研究价值。GDF15的表达能促进胰腺癌细胞的增殖、迁移、耐药。信号通路方面,GDF15可能是通过Smad通路或NF-κB通路来增强EMT,从而导致化疗耐药的产生。