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背景:全身炎症反应综合征(SIRS)是引起重症急性胰腺炎(SAP)早期并发症和致死的主要病理驱动因素,脂氧素A4(ATL)是一种具有强大抗炎效应的脂质,能调解SAP诱发的SIRS,而区域动脉灌注给药已被证实是治疗SAP的有效途径。
目的:探讨区域动脉灌注ATL对SAP大鼠的治疗效应,SIRS的调节及潜在机制。
方法:42只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成假手术组,胰腺炎组,ATL区域动脉灌注组,后两组于胰胆管逆行注射5%牛黄胆酸钠诱导SAP后30min分别经胃左动脉逆行注射等量生理盐水、ATL(0.1mg/kg)进行干预,分别于12h和24h收集腹水量,检测血清淀粉酶、磷脂酶A2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6);取部分胰腺固定进行形态学研究及免疫荧光法观察血红素氧合酶-1(HO-1)、核因子κB p65(NF-κB p65)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和血小板内皮细胞粘附分-1(PECAM-1)的表达;部分胰腺组织冻存用于检测髓过氧化物酶(MPO)活性和WB法检测HO-1、NF-κB p65、PECAM-1和ICAM-1的含量。
结果:
(1)与假手术组相比,胰腺炎组和ATL灌注组腹水量、胰腺系数、胰腺组织MPO活性和胰腺Schmidt病理评分均有显著提高;随着时间的推移,胰腺炎组和ATL灌注组腹水量、胰腺组织MPO活性和胰腺Schmidt病理评分逐渐升高,而胰腺系数变化不明显;与胰腺炎组相比,ATL灌注组胰腺组织MPO活性和胰腺Schmidt病理评分均显著下降,而胰腺系数只在24h时间点才显著降低,腹水量变化在两个时间点都无统计学意义。
(2)与假手术组相比,胰腺炎组和ATL灌注组血清淀粉酶和磷脂酶A2活性均显著升高;随着时间的推移,胰腺炎组和ATL灌注组血清磷脂酶A2活性逐渐升高,而血清淀粉酶活性在24h时间点却低于12h时间点;ATL灌注组血清淀粉酶和磷脂酶A2活性在不同时间点均比胰腺炎组显著降低。
(3)与假手术组相比,胰腺炎组和ATL灌注组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平均显著升高;随着时间的推移,胰腺炎组和ATL灌注组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平成下降趋势;相比胰腺炎组,ATL灌注组血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平在两个时间点均显著下降。
(4)免疫荧光和WB分析显示:假手术组胰腺组织中HO-1和NF-κB p65蛋白弱表达,而胰腺炎组HO-1和NF-κB p65蛋白表达显著增强; ATL灌注组胰腺组织中HO-1蛋白表达相比胰腺炎组继续增加(P<0.05,免疫荧光分析;P<0.01,WB分析);免疫荧光显示相比胰腺炎组,ATL灌注组胰腺组织中NF-κBp65核内移位在两个时间点均显著降低; WB分析显示ATL灌注组胰腺组织中核蛋白NF-κB p65含量相比胰腺炎组在不同时间点也显著减少。
(5)免疫荧光和WB分析显示:假手术组胰腺组织中PECAM-1和ICAM-1蛋白表达几乎不表达,而胰腺炎组PECAM-1和ICAM-1蛋白表达显著增强; ATL灌注组胰腺组织中PECAM-1和ICAM-1平均荧光强度在两个时间点均显著低于胰腺炎组;WB结果显示相比胰腺炎组,ATL灌注组胰腺组织中PECAM-1和ICAM-1蛋白含量在不同时间点也显著降低。
结论:
(1)区域动脉灌注ATL对重症急性胰腺炎具有治疗作用,能降低胰腺系数、减少胰腺水肿,抑制胰腺组织中性粒细胞渗出,降低胰腺病理评分,减少胰腺淀粉酶和PLA2释放。
(2)区域动脉灌注ATL能抑制SAP大鼠体内多种促炎因子的产生,对SIRS具有调节作用。
(3)区域动脉灌注ATL产生上述作用的机制可能是通过诱导胰腺组织HO-1表达增强,抑制NF-κB向核内转移,从而减少炎症因子TNF-α、IL-1β和1L-6的产生,下调粘附分子PECAM-1和ICAM-1的表达,后者能抑制中性粒细胞向胰腺组织转移,进一步减少炎症因子的生成。