野生茄子(Solanum torvum Swartz)，原产于印度尼西亚的爪哇岛，具有优良的抗病性及抗逆性。日本科学家于1986年引种后，经过多年选育，已育成茄子设施栽培上专用耐盐砧木品种‘Torvum Vigor’。本研究构建了野生茄子‘Torvum Vigor’叶片cDNA文库并分析其EST序列，结合RT-PCR技术克隆了耐盐相关基因StBADH。将耐盐相关基因StBADH用于构建抗除草剂植物表达载体pCAMBIA3301-StBADH-T800，并将其遗传转化盐敏感‘金棚一号’番茄，获得了抗除草剂的转基因番茄植株。主要研究结果如下:　　1.以‘Torvum Vigor’叶片为试验材料，采用改进的SMART(Switchingmechanism at5-end of RNA transcript)技术和LD-PCR(Long-distance PCR)方法，利用pBluescriptⅡ SK(+)载体构建了cDNA文库。该文库初始滴度为3.6×106cfu·mL-1，扩增后文库滴度达1.2×1010 cfu·mL-1。经过蓝白斑计数，文库的重组率高达99％，平均插入片段长度为0.4-2.5 kb。表明所构建的文库是一个高质量的全长cDNA文库，达到了用于目的基因分离筛选的建库要求。　　2.在构建的野生茄子叶片cDNA文库中随机挑选427个阳性克隆进行测序，获得的原始序列去除不可读序列后，共得到364条高质量的EST序列，序列递交NCBI数据库（GenBank登录号:JK265131-JK265494）。在已递交的364条EST序列中，74.72％含有全长编码区。BLASTX分析表明62.4％的EST序列与其他物种的一些已报道的蛋白具有很高的同源性，获得了9个与耐盐性状等有关基因的EST序列（耐盐相关基因5个）。　　3.通过RT-PCR技术从‘Torvum Vigor’叶片中，克隆了耐盐相关基因StBADH（GenBank登录号:JN812057）。该基因核苷酸序列全长1518 bp，包含1个完整的开放阅读框，编码505个氨基酸残基，推测的蛋白质分子量为55.9 kDa，理论等电点为5.42，其氨基酸序列与番茄的同源性达96％。通过系统进化树分析表明，‘TorvumVigor’甜菜碱醛脱氢酶与同科植物番茄最先聚类。　　4.利用内切酶HindⅢ和EcoRⅠ分别双酶切pT800质粒DNA（含有CaMV35S启动子、pUC18 Polylinker多克隆位点、Nos终止子）与植物表达载体pCAMBIA3301（含bar），构建中间载体pCAMBIA3301-T800。再将StBADH和中间载体pCAMBIA3301-T800分别通过内切酶SmaⅠ和XbaⅠ双酶切，成功地构建了抗除草剂植物表达载体pCAMBIA3301-StBADH-T800，并将此质粒利用冻融法导入根癌农杆菌LBA4404。　　5.利用番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）栽培品种‘金棚一号’下胚轴和子叶外植体，研究了不同苗龄和激素配比对不定芽分化及生根的影响。并用根癌农杆菌介导法将抗除草剂植物表达载体pCAMBIA3301-StBADH-T800遗传转化‘金棚一号’番茄。结果表明:以10d苗龄的下胚轴和子叶在MS+0.2 mg·L-1 ZT+1 mg·L-1 IAA芽诱导培养基上不定芽再生频率最高，下胚轴为83.3％、子叶为75.6％。MS+0.5mg·L-1 IAA是诱导不定芽生根的理想培养基，7d后生根率为100％。番茄遗传转化过程中不定芽再生培养基中添加bialaphos的最佳筛选浓度为2 mg·L-1，生根培养基中添加bialaphos的最佳筛选浓度为1 mg·L-1，羧苄青霉素的抑菌浓度为500 mg·L-1。最终遗传转化率平均为2.5％(2/80)。所得到抗性植株均表现出对除草剂Basta的抗性，叶片和根系分别经组织化学染色检测，GUS显色均为蓝色;StBADH、bar以及GUS基因PCR检测均为阳性，获得2株T0代转基因番茄植株。