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目的通过氧自由基代谢、线粒体途径和内质网途径心肌细胞凋亡的研究,观察山莨菪碱对心脏骤停(CA)和复苏后心肌超微结构损伤的保护作用;并观测山莨菪碱对复苏后心肌细胞间信号传导结构和功能的影响。方法1.健康家猪23只随机分为对照组(n=5)、肾上腺素组(n=9)和山莨菪碱组(n=9)。电刺激法建立心脏骤停模型,室颤9min后心肺复苏,山莨菪碱组为复苏过程中联合应用山莨菪碱。计算并比较两组心脏骤停猪的心肺复苏(CPR)时间及ROSC成功率。2.在基础时点、CA8min、自主循环恢复(ROSC)即刻、ROSC30min和ROSC24h留取血液标本,ROSC24h处死动物留取心肌组织标本。分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量;ELISA氵去测定细胞色素C及Caspase-3蛋白含量。3.透射电镜下观察心肌组织超微结构;Hoechest33258染色测定心肌细胞凋亡率;RT-PCR和Western Blot方法测定心肌Caspase-12、氨基末端激酶(JNK)和calpain mRNA含量和蛋白表达量。4.免疫荧光染色法测定心肌组织Cx43表达水平和分布;RT-PCR和Western Blot方法测定心肌组织总Cx43、Calpain mRNA含量和蛋白表达量,并测定总Cx43中p-Cx43的蛋白表达量。结果1.山莨菪碱组ROSC成功率77.78%较肾上腺素组55.56%提高22.22%,山莨菪碱组CPR时间较肾上腺素组缩短近100s,但差异无统计学意义(P>0.05)。2.①山莨菪碱组心肌SOD活力明显高于肾上腺素组(P<0.01)。②山莨菪碱组ROSC30min、ROSC24h血浆MDA含量较肾上腺素组减少(P<0.05)。③山莨菪碱组ROSC30min、ROSC24h血浆CytoC蛋白含量较肾上腺素组减少(P<0.05)。④两复苏组血浆各时点及心肌Caspase-3蛋白含量均无显著差异(P>0.05)3.肾上腺素组心肌细胞内线粒体、内质网和细胞核损伤严重。山莨菪碱组细胞超微结构损伤较肾上腺素组明显减轻,细胞器和细胞核形态基本正常。山莨菪碱负调控caspase-12,JNK和Calpain mRNA含量及蛋白表达量。4.山莨菪碱组心肌纤维排列较规整,Cx43荧光信号高于肾上腺素组(P<0.05);山莨菪碱组Calpain mRNA含量和蛋白表达量均低于肾上腺素组(P<0.05);两复苏组Cx43mRNA含量和蛋白表达量无统计学差异;山莨菪碱组p-Cx43蛋白表达量高于肾上腺素组(P<0.01),接近于对照组(P>0.05)。各组组间p-Cx43/Cx43无显著差异(P>0.05)。结论1.经右心室电刺激法是建立心室纤颤心脏骤停模型的有效方法;室颤9min后进行复苏,山莨菪碱可以缩短复苏时间近100s,可以提高复苏成功率22.22%。2.山莨菪碱可以改善心脏骤停复苏后氧自由基代谢紊乱,并通过抑制线粒体途径和内质网途径的心肌细胞凋亡,减轻复苏后心肌超微结构损伤程度。3.山莨菪碱通过上调总Cx43中p-Cx43的表达量,保护心脏骤停复苏后心肌细胞间信号传导结构及功能。