目的：通过观察温和灸与特定电磁波谱治疗仪（TDP）对大鼠难愈性创面组织修复的疗效，观测其愈合时间、创面愈合率、白介素-6（IL-6）、类胰岛素生长因子（IGF-1）、表面巨噬细胞计数、微血管密度（MVD）及其Ⅰ、Ⅲ型胶原含量等指标的变化，以探讨温和灸对难愈性创面组织修复的作用机理，以期为灸法临床治疗难愈性创面提供可靠的实验依据。方法：采用付氏法复制大鼠难愈性创面模型。选取出生6周，体重200～220g的健康SD雄性大鼠112只。将其随机分成两批，第一批32只，主要用于观察温和灸和TDP两种方法对创面愈合时间和创面愈合率的影响。先将32只大鼠腹腔注射盐酸氯胺酮150mg／kg，麻醉后造模区（腰椎正中偏上）剪毛，用直径20mm塑料瓶盖在造模区标记造模面积，新洁尔灭酊棉球皮肤消毒，沿标记线剪去皮下组织至肌筋膜，止血，消毒纱布敷料覆盖伤口。再随机分为4组：空白对照组（以下简称为空白组）、温和灸治疗组（以下简称为温灸组）、特定电磁波治疗仪（TDP）治疗组（以下简称为TDP组）、模型组，每组各8只，分笼单独饲养；第二批80只，主要用于观察不同时间各组大鼠血清IL-6、IGF-1的含量和创面组织表面巨噬细胞数、MVD及Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的变化。将其随机分成4组，即正常对照组（以下简称为正常组）8只、温灸组24只、TDP组24只、模型组24只，其中温灸组、TDP组、模型组造模同上，正常组不做任何处理，各组均分笼单独饲养。自造模次日起，温灸组、TDP组及模型组均肌注氢化可的松琥珀酸钠100mg/kg，隔日1次，共注射7次。自造模次日起开始治疗，温灸组将大鼠置于自制灸盒中，用艾条温和灸创面局部及双侧肾俞、足三里穴各15min；TDP组将大鼠置于自制灸盒中，TDP照射创面局部及双侧肾俞、足三里穴各15min；模型组、正常组及空白组均将大鼠置于自制灸盒中15min，不施加任何干预。各组治疗期间均自由进食饮水，动物饲料是由河北医科大学实验动物中心提供的普通全价饲料。各实验组大鼠的创面愈合时间由专人记录，并分别于造模后第3天、7天、10天、14天测量创面面积，其由专人专机固定高度拍摄，photoshopCS3软件分析而成。于造模次日早晨，检测实验组大鼠血清IL-6的含量，造模后第7天、10天、14天，分别检测相应实验组大鼠血清IGF-1的含量和创面组织中表面巨噬细胞数、MVD及Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量等指标。所有数据均采用SPSS13.0软件进行统计分析。计量数据以（x±s）表示，组间差异用t检验。结果：1温和灸对大鼠创面愈合时间（天）的影响治疗后，大鼠创面愈合时间（天）温灸组、TDP组、模型组（18.20±1.48、21.40±2.07、25.40±1.51）均显著长于空白组（15.20±1.30），差异有统计学意义（P<0.01），说明大鼠难愈性创面模型复制成功；温灸组大鼠创面愈合天数明显短于TDP组和模型组，差异有统计学意义（P<0.01）；TDP组与模型组比较，差异亦有统计学意义（P<0.01）。2造模次日各组大鼠血清IL-6含量（pg/ml）的比较造模次日，大鼠血清IL-6含量（pg/ml）温灸组、TDP组、空白组和模型组（80.77±4.68、80.29±4.68、77.56±7.62、76.38±6.04）四组比较，差异无统计学意义（P>0.05），说明4组大鼠的受损程度无明显差异，具有可比性。3温和灸不同时间对大鼠创面愈合率（%）的影响3.1造模后第3天时，温和灸对大鼠创面愈合率（%）的影响造模后第3天时，大鼠创面的愈合率（%）温灸组、空白组（18.86±1.68、19.71±2.06）高于模型组（16.86±1.57）2%以上，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组（18.14±1.35）与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；温灸组、TDP组、空白组三组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。3.2造模后第7天时，温和灸对大鼠创面愈合率（%）的影响造模后第7天时，大鼠创面愈合率（%）温灸组、TDP组、模型组（54.00±3.74、48.14±4.49、36.43±2.37）均低于空白组（63.71±2.87）9%以上，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组高于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组高于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。3.3造模后第10天时，温和灸对大鼠创面愈合率（%）的影响造模后第10天时，大鼠创面愈合率（%）温灸组、TDP组、模型组（66.43±3.1、57.29±2.14、44.29±2.93）均低于空白组（80.57±3.26）14%以上，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组高于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组高于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。3.4造模后第14天时，温和灸对大鼠创面愈合率（%）的影响造模后第14天时，大鼠创面愈合率（%）温灸组、TDP组、模型组（86.43±3.45、76.29±5.41、60.0±2.77）均低于空白组（95.29±2.56）9%以上，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组高于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组高于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。4温和灸不同时间对大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）的影响4.1造模后第7天时，温和灸对大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）的影响造模后第7天时，大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）温灸组（55.43±12.78）高于TDP组、模型组、正常组（40.72±10.20、40.39±6.91、36.17±8.71）14ng/ml以上，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组、模型组、正常组三组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。4.2造模后第10天时，温和灸对大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）的影响造模后第10天时，大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）温灸组、TDP组、模型组（324.16±72.22、119.46±47.69、60.37±5.84）高于正常组（36.17±8.71）24ng/ml以上，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）；温灸组高于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.01）；TDP组高于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。4.3造模后第14天时，温和灸对大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）的影响造模后第14天时，大鼠血清IGF-1含量（ng/ml）温灸组、TDP组、模型组（89.68±10.43、99.43±12.17、108.25±19.78）均高于正常组（36.17±8.71）53ng/ml以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组低于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组低于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。5温和灸不同时间对大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）的影响5.1造模后第7天时，温和灸对大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）的影响造模后第7天时，平均一视野大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）温灸组、TDP组、模型组（15.0±0.76、14.25±1.17、11.00±0.76）均多于正常组（4.50±1.20）6.5个以上，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组多于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组与TDP组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；TDP组与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。5.2造模后第10天时，温和灸对大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）的影响造模后第10天时，平均一视野大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）温灸组、TDP组、模型组（25.00±2.93、21.75±1.58、16.75±1.91）均多于正常组（4.50±1.20）12个以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组多于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组多于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。5.3造模后第14天时，温和灸对大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）的影响造模后第14天时，平均一视野大鼠创面巨噬细胞计数（个/mm~2）温灸组、TDP组、模型组（11.75±1.20、15.00±1.31、18.25±1.58）均多于正常组（4.50±1.20）7个以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组少于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；TDP组少于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.05）。6温和灸不同时间对大鼠创面MVD（个/cm~2）的影响6.1造模后第7天时，温和灸对大鼠创面MVD（个/cm~2）的影响造模后第7天时，大鼠创面平均MVD（个/cm~2）温灸组、TDP（15.60±1.34、14.60±1.14）均高于正常组（10.80±1.48）3个/cm~2以上，差异有统计学意义（P<0.01）；模型组（12.80±1.30）高于正常组2个/cm~2以上，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组高于模型组，差异有统计学意义（P<0.01）；TDP组高于模型组，差异有统计学意义（P<0.05）；温灸组与TDP组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。6.2造模后第10天时，温和灸对大鼠创面MVD（个/cm~2）的影响造模后第10天时，大鼠创面平均MVD（个/cm~2）温灸组、TDP组、模型组（22.20±1.64、19.60±1.14、16.20±1.30）均高于正常组（10.80±1.48）5个/cm~2以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组高于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.01）；TDP组高于模型组比较，差异亦有统计学意义（P<0.01）。6.3造模后第14天时，温和灸对大鼠创面MVD（个/cm~2）的影响造模后第14天时，大鼠创面平均MVD（个/cm~2）温灸组、TDP组、模型组（12.40±1.13、14.50±1.24、19.30±1.67）均高于正常组（10.80±1.48）1.6个/cm~2以上，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）；温灸组低于TDP组、模型组，差异有统计学意义（P<0.05；P<0.01）；TDP组低于模型组，差异亦有统计学意义（P<0.01）。7温和灸不同时间对大鼠创面Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响7.1造模后第7天时，温和灸对大鼠创面Ⅰ型胶原蛋白表达的影响造模后第7天时，大鼠创面Ⅰ型胶原蛋白表达的平均光密度温灸组、TDP组（0.075±0.116、0.064±0.010）均高于模型组（0.035±0.061）0.02以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组与TDP组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。7.2造模后第7天时，温和灸对大鼠创面Ⅲ型胶原蛋白表达的影响造模后第7天时，大鼠创面Ⅲ型胶原蛋白表达的平均光密度温灸组、TDP组（0.070±0.009、0.063±0.007）均高于模型组（0.031±0.009）0.02以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组与TDP组比较，差异性无统计意义（P>0.05）。7.3造模后第14天时，温和灸对大鼠创面Ⅰ型胶原蛋白表达的影响造模后第14天时，大鼠创面Ⅰ型胶原蛋白表达的平均光密度温灸组、TDP组（0.182±0.116、0.119±0.030）均高于模型组（0.075±0.006）0.04以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组高于TDP组，差异有统计学意义（P<0.01）。7.4造模后第14天时，温和灸对大鼠创面Ⅲ型胶原蛋白表达的影响造模后第14天时，大鼠创面Ⅲ型胶原蛋白表达的平均光密度温灸组、TDP组（0.188±0.356、0.120±0.316）均高于模型组（0.065±0.009）0.05以上，差异有统计学意义（P<0.01）；温灸组高于TDP组，差异有统计学意义（P<0.01）。7.5造模后第7、14天时，温和灸对大鼠创面Ⅰ/Ⅲ比值的影响造模后第7天时，与正常组大鼠创面Ⅰ/Ⅲ比值（0.97±0.159）比较，温灸组、TDP组（1.09±0.247、1.02±0.239）差异无统计意义（P>0.05），模型组（1.23±0.351）差异有统计意义（P<0.05)；温灸组与模型组比较差异无意义（P>0.05）；TDP组与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.05)。造模后第14天时，温灸组、TDP组（1.02±0.231、0.87±0.217）与正常组比较，差异无统计意义（P>0.05）；模型组（1.20±0.270）与正常组比较，差异有统计学意义（P<0.05)；温灸组、TDP组与模型组比较，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）；温灸组与TDP组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1温和灸和TDP均能缩短大鼠难愈性创面的愈合时间，温和灸缩短时间更明显。2温和灸和TDP均可调节不同时期难愈性创面大鼠血清IGF-1的含量。早期可通过调节血小板和成纤维细胞释放IGF-1的活性，提高其血清含量，进而刺激血管内皮细胞迁移到创伤部位，促使新生血管的形成，继而促进创面的愈合；晚期又可降低其血清含量，促进过度增生的胶原降解，减少瘢痕的形成。3温和灸和TDP均可调节不同时期大鼠难愈性创面巨噬细胞的数量。早期可提高创面巨噬细胞数，促进吞噬和清除异物与衰老伤亡细胞的功能，同时可以通过其分泌的多种生物活性物质刺激组织血管生成，促进创面愈合；晚期又可降低创面巨噬细胞数，凸显其调节结缔组织基质的合成和分解的作用，进而使胶原反复溶解沉积和更新，达到组织改建、减少瘢痕的目的。4温和灸和TDP均可调节不同时期大鼠难愈性创面MVD。早期可提高创面MVD，改善局部微循环，促使受损组织得以修复；晚期又可降低创面MVD，避免瘢痕组织过度增生，改善修复质量。5温和灸和TDP均可提高大鼠难愈性创面Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量，通过调节成纤维细胞的活性，促进Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成与分泌，继而使创面得到修复，同时可以调节创面增生组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的比例，减少瘢痕的形成，提高修复质量。6温和灸和TDP均可起到促进难愈性创面愈合的作用，但温和灸起效较快、作用较持久、创面瘢痕形成较少，总体疗效优于TDP治疗。