植物在正常生长和应激条件下,体内会产生活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）,植物体内多种信号转导途径被激活,通过多种生理反应来实现自身的氧化还原平衡。RCD1（radical-induced cell death1）参与植物的正常生长发育,是重要的转录因子调节子,在许多抗逆信号通路中起着重要作用。其中RCD1与ROS相关逆行信号转录因子ANAC013和ANAC017相互作用,维持线绿体和叶绿体的氧化还原平衡。已有研究表明OCP3和GPX3在拟南芥中可能通过活性氧通路调控植物的生长发育。本论文首先构建钓饵载体和诱饵载体,通过酵母双杂交实验确定了与RCD1相互作用的蛋白OCP3和GPX3,为了鉴定互作位点,我们对RCD1进行了生物信息学分析,依据数据库结果设计引物获得了RCD1不同保守结构域克隆,最终确认RST为其相互作用区域。此外,利用同源重组的方法构建了融合蛋白标签序列的植物表达载体,获得转基因植物和杂交系植株,为后续通过免疫共沉淀进行蛋白互作的体内验证提供了实验材料。与此同时,构建互作蛋白OCP3、GPX3基因编辑载体,获得突变体材料,以便进一步了解RCD1与OCP3、GPX3互作在调控植物氧化还原平衡体系中的分子机制。本试验取得以下结果:1.成功构建了钓饵载体pDEST32-RST、pDEST32-WWE和诱饵载体pDEST22-OCP、pDEST22-GPX,利用酵母双杂交实验验证了RCD1与OCP3和GPX3存在相互作用,且是通过RST结构域实现的相互作用。2.构建含有m Cherry可视化筛选功能的CRISPR/Cas基因编辑载体pKEE401Echerry-ocp3、pKEE401Echerry-gpx3、pKEE401Echerry-ocp3&gpx3,完成T0转基因植株的侵染,筛选得到杂合突变体材料。3.通过重组技术成功构建含有融合蛋白标签序列的植物表达载体,通过观察转基因植物的表型以及半定量的方法检测到基因的表达量有所提高,将转基因植株进行杂交获得免疫共沉淀材料。