时间分辨荧光免疫分析是20世纪80年代以来发展起来的一项新的免疫分析技术,它使用具有荧光寿命长、Stokes位移大、特征峰尖锐等特点的稀土配合物作为标记物,通过延迟测量时间的方法,有效地消除背景荧光的干扰。因此,时间分辨荧光免疫分析法具有比其它免疫分析方法更高的灵敏度。时间分辨荧光免疫分析法中重要的是双功能螯合剂的合成,其中杂环母体、蛋白质连接基团和稀土离子螯合配位基团的合成是实现双功能的关键所在。本研究从直接固相时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂合成需要出发,以2,6-二溴吡啶为起始原料,经过氧化、硝化、还原、亲核取代等反应合成了2,6-二(3’-乙酯基-1’-吡唑基)-4-氨基吡啶及3-甲基吡唑、3-吡唑甲酸、3-吡唑甲酸乙酯几种重要的中间体。利用差热分析、红外光谱、~1H核磁、元素分析等测试手段对各步产物进行了表征。此外,还对部分中间体的合成条件、反应机理进行了研究。本实验中合成的化合物2,6-二(3’-乙酯基-1’-吡唑基)-4-氨基吡啶分子中羧基上的氧原子可通过穴状螯合物结构实现与镧系金属的配位;环上4-氨基则可通过取代反应引入其他基团实现与蛋白质的连接。