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目的:1)总结导师学术思想。2)观察俞氏内异方组及葛根素治疗子宫内膜异位症(EM)的疗效并探讨其可能的作用机制。方法:1)采用临床随诊、与导师交流及查阅导师文献方法。2)通过临床观察、动物及体外实验,利用EM在位、异位内膜细胞原代培养技术、鸡胚尿囊膜(CAM)模型、基因芯片等方法。结果:1)导师学术思想:提出生命网络调节为医学行为调控人体模式的观点。2)48例EM病人治疗有效率为93.75%,妊娠率为75%。3)葛根素能够抑制EM异位灶的生长,减弱异位内膜细胞色素芳香化酶P450的表达,抑制异位灶新生血管的形成。葛根素还可通过调整EM癌基因、抑癌基因、细胞周期相关因子基因表达,并通过影响凋亡相关基因的表达,促进细胞凋亡。结论:1)导师的学术思想对临床及科研工作均有指导作用。2)俞氏内异方组可显著改善EM病人的症状和体征,同时还可改善EM病人的卵巢功能,促进不孕者妊娠。2)葛根素是治疗EM十分有潜力的药物,值得进一步开发研究。
目的:1)总结导师学术思想。2)观察俞氏内异方组治疗子宫内膜异位症(EM)的临床疗效并探讨其可能的作用机制。3)观察葛根素对EM的治疗作用,并观察其对EM异位灶雌激素水平、细胞色素芳香化酶P450、血管形成的影响,以及葛根素对EM肿瘤相关基因的调控作用。
方法:1)采用临床随诊、与导师交流及查阅导师文献方法。2)用以益气补肾化瘀为主的水煎内服方、灌肠方及外敷方的俞氏内异方组治疗EM病人,观察治疗前后临床症状、体征、基础体温(BBT)、血生殖内分泌水平的变化及对不孕者的效果。2)通过动物实验,观察葛根素对子宫内膜异位症的治疗作用,及其对EM异位灶雌激素水平、细胞色素芳香化酶P450蛋白表达的影响。3)利用EM在位、异位内膜细胞原代培养技术、鸡胚尿囊膜(CAM)模型、基因芯片等方法,了解EM异位内膜细胞形态学特点及肿瘤相关基因表达的情况,观察葛根素对EM血管生成、肿瘤相关基因的调控作用。
结果:1)导师学术思想:提出生命网络调节为医学行为调控人体模式的观点。指出:中医天人合一的整体观、辩证观对调控人体生命网络具有指导意义;在临床实践中,诊治妇产科疾病须和保障今后女性生殖健康相结合,辨病辨证及审因相结合、治疗与预防相结合、宏观与微观相结合;在医学研究中,要以微观证据补充中医证治内容、以宏观的中医证治内容补充西医诊治方法。2)48例EM病人治疗有效率为93.75%,其中20例不孕病人15例妊娠,妊娠率为75%。治疗后病人痛经积分及非经期盆腔痛积分显著降低(P<0.01),卵巢内膜样囊肿明显缩小(P<0.01),病人的BBT类型分布及HPS(HighPhaseScore)评分(P<0.01)都有明显好转,病人血清PRL水平明显下降(P<0.05),LH、E2水平显著上升(P<0.05)。3)葛根素大、中、小剂量组异位内膜组织重量分别显著低于模型组(P<0.001)。葛根素大、中、小剂量均能明显降低异位内膜组织、卵巢和血清雌激素水平,并抑制EM在位、异位内膜组织细胞色素芳香化酶P450蛋白的表达。小剂量的葛根素作用强于大、中剂量的葛根素。4)EM异位内膜腺上皮细胞与EM在位内膜及正常在位内膜腺上皮细胞形态基本相似。EM异位内膜基质细胞较EM在位及正常对照组在位内膜基质细胞小,异染色质增多,核增大,而且细胞膜表面有较多的微绒毛和胞浆突起。CAM模型:葛根素可明显抑制种植内膜组织囊泡及周边血管形成。其血管阳性面积显著小于空白组(P<0.05)。基因芯片结果:增殖期EM在位内膜组织较之正常在位内膜组织,ERBB2、ETS2、FOS、S100A4、TEK、TERT、NFKBIA等癌基因表达明显增强;与细胞黏附、侵袭、转移、血管生成相关的基因CDH1、CD44、ITGA6、NCAM1、MMP1、FLT1及抑制细胞凋亡基因AKT1、BCL2L、BIRC5表达明显上调;而抑癌基因KAI1、KISS1、SERPINB5及促凋亡相关基因TNFRSF25、TNFRSF1A、TNFRSF6和抑制侵袭相关基因SERPINB2表达明显下降。EM异位内膜组织与EM在位内膜组织比较,基因表达亦有明显不同:癌基因ERBB2、ETS2、FOS,抑制凋亡基因BCL2L1,细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4、CDC25A,生长因子及其受体HGF、FGFR2、TGFBR基因表达均明显增强;抑癌基因KAI1、SERPINB5,促凋亡基因BAD、TNF,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子CDKN2A基因显著下调。小剂量葛根素可明显上调EM在位基质细胞凋亡基因BAD、BAX、CASP8、CASP9、TNFRSF6表达,并增强细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子CDKN1B、CDKN2A及IFNA1、INFB1基因表达;减少癌基因FOS、CHEK2、SRC和黏附侵袭基因ITGB5、MMP-9及生长、转录因子基因PDGFA、NFKBIA表达。
结论:1)导师的学术思想对临床及科研工作均有指导作用。2)俞氏内异方组可显著改善EM病人的症状和体征,同时还可改善EM病人的卵巢功能,促进不孕者妊娠。2)EM异位内膜基质细胞超微结构与正常妇女及EM在位内膜细胞有显著不同,有类似肿瘤细胞样改变。EM在位内膜组织与正常在位内膜组织、EM异位内膜组织与EM在位内膜组织比较,肿瘤相关基因表达有显著的不同。3)葛根素能够抑制EM异位灶的生长,其作用机制可能为:减弱异位内膜细胞色素芳香化酶P450蛋白的表达,抑制了异位内膜的雌激素自分泌;抑制异位灶新生血管的形成,减少了异位灶的血液供应。葛根素还可通过调整EM癌基因、抑癌基因、细胞周期相关因子基因表达,并通过影响凋亡相关基因的表达,促进细胞凋亡,从而改变EM内膜细胞类似肿瘤细胞的恶性行为。