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本文从低质饼粕高效利用的角度出发,开发了一种酶解棉籽饼粕生产小肽的工艺,并对分子量在1kDa及以下的棉籽水溶性小肽进行了定性与定量检测,论文共分三章。第一章,针对现阶段尚无小肽评价标准的现状,首次引入凝胶电泳作为棉籽饼粕中蛋白和肽的快速评价平台,对其中的浓缩胶、分离胶的浓度和交联度进行了讨论,优化并建立了一种用于棉籽肽快速检测的Tricine-SDS-PAGE方法,并对该方法的准确度进行了评价。第二章,以水解度为指标,结合论文第一章的Tricine-SDS-PAGE方法对酶解前后棉籽蛋白的分子量与含量变化的比较,研究了酶添加量(g/g)、底物浓度(g/v)、pH、温度以及时间对Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味酶酶解能力的影响。最终确立Alacalase碱性蛋白酶的酶解参数为:酶添加量3%(g/g)、底物浓度5%(g/v)、酶解pH 8.0,酶解温度为60℃、酶解时间6小时。Flavourzyme复合风味酶的酶解参数为酶添加量4%(g/g)、底物浓度5%(g/v)、酶解pH7.0,酶解温度50℃、酶解时间4小时。第三章,论文对棉籽小肽分别进行了定性和定量分析。定性分析方面,采用HPLC分子排阻法结合LTQ线性离子阱液质联用仪对样本中收集得到的水溶性小肽进行定性检测和序列测定,结果表明酶解液中的水溶性小肽分子量均在1.5kDa左右,并鉴定出14个棉籽小肽的序列,其中分子量1.5kDa以下的肽10个;分子量1.5kDa-2kDa区间的肽3个;分子量大于2kDa的肽1个。定量分析方面,论文以1.5kDa及以下的小肽含量作为棉籽小肽含量的评价标准,测定了Alcalase酶解液中小肽含量为51.8635%; Flavourzyme酶解液中小肽含量为29.6607%;复合酶解液中的小肽含量为53.2849%,并建议在没有超滤设备的情况下,通过以下步骤获得并计算1.5kDa及其以下的水溶性小肽总含量:①样本悬浊液离心3500r×15min,取上清液;②上清液过0.45um微孔滤膜,冻干;③冻干粉以蒸馏水溶解并离心7500r×15min,取上清液;④采用GB/T 6432-1994饲料中的粗蛋白测定方法测定溶液中小肽总含量。