目的:研究不同波长光照射对视网膜色素上皮细胞形态、功能及分泌生长因子的影响,试从细胞生物学水平和分子生物学水平探讨近视眼的发病机制。方法:酶消化法分离培养人胚 RPE 细胞,通过生长曲线的绘制、形态学和免疫学鉴定、透射电镜检查等方法分析 RPE 细胞的生物学特性;将人胚 RPE 细胞置于不同波长光线下培养,通过 MTT 法、透射电镜检查等研究不同波长光对人胚RPE 细胞体外生长特性的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定不同波长光线下培养的 RPE 细胞分泌的 HGF、bFGF 和 TGF-β 的量,并用 RT-PCR 法检测不同波长光照射后 RPE 细胞 HGF 的 mRNA 表达水平,从而分析体外培养的 RPE细胞在光信号传导中的作用;通过生长曲线的绘制,MTT 法检测细胞活性研究外源性 TGF-β刺激人 RPE 细胞后细胞自身的生长情况及采用 RT-PCR 法检测TGF-β作用后 RPE 细胞表达 HGF 的情况;MTT 法检测不同波长光照射下 TGF-β对人胚 RPE 细胞增生的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定不同波长光线下 TGF-β刺激人 RPE 细胞后,RPE 细胞分泌的 HGF、bFGF 和 TGF-β 的量。结果:体外培养的人胚 RPE 细胞生长旺盛,超微结构仍保持正常;各种光照均使 RPE 细胞生长变慢,其中,蓝光下培养的细胞生长最慢,并有超微结构的变化;ELISA 结果显示人胚 RPE 细胞可分泌 HGF、bFGF 和 TGF-β,在受到不同波长的光照射后,不同时间 HGF、bFGF 和 TGF-β 的分泌量也不一样,RT-PCR 结果显示不同波长光照射后 RPE 细胞 HGF 的 mRNA 表达水平不同;不同浓度 TGF-β 均可抑制人胚 RPE 细胞的生长;并随着时间的延长,这种作用更加明显;TGF-β可明显抑制 RPE 细胞内 HGF 的表达;不同波长光照射下 TGF-β 对人胚 RPE 细胞增生的影响各不相同,ELISA 结果:TGF-β 对其他两种因子的分泌均有抑制作用,但对自身却是促进作用,是一个正反馈调节。结论:通过本课题的研究,初步明确了 RPE 细胞的生物学特性及其分泌生长因子的相互作用,为进一步阐明近视眼的发病机制奠定了基础。