论文部分内容阅读
本试验以乌鳢为研究对象,对照组(control group,CT)饲喂膨化饲料,试验组日粮是在对照组日粮的基础上分别添加适宜含量的酵母铬(yeast chromium,YC)、三丁酸甘油酯(tributyrin,TB)和胆汁酸(bile acid,BA)。乌鳢初始体重约为69.94g。试验为期60天。本论文旨在研究三种饲料添加剂对乌鳢生长性能、肠道消化酶和形态结构、胃组织结构、肝脏糖代谢、脂代谢和组织结构的影响,并采用代谢组学方法分析乌鳢代谢变化。 1、日粮中添加酵母铬、三丁酸甘油酯和胆汁酸后,乌鳢末均重、增重率和特定生长率显著升高,摄食率和饵料系数显著降低,肝体比、脏体比、肠长比和肥满度以及乌鳢肌肉中水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分差异不显著(P>0.05)。 2、添加酵母铬,显著减少血氨、尿素氮与总胆固醇含量;添加三丁酸甘油酯,显著增加血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;添加胆汁酸,显著升高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)以及显著降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量(P<0.05);三种饲料添加剂均能显著降低血清中甘油三酯(TG)含量(P<0.05);添加酵母铬与三丁酸甘油酯,显著降低血糖含量。 3、添加酵母铬和三丁酸甘油酯,显著升高肠道GSH-Px和脂肪酶活力;三种饲料添加剂均能显著降低肠道丙二醛(MDA)含量;添加三丁酸甘油酯显著升高肠道胰蛋白酶和胃蛋白酶活力(P<0.05)。 4、日粮中添加酵母铬和胆汁酸,肝脏丙酮酸羧化酶(PC)活力显著降低;添加酵母铬,果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)活力显著降低。分别与对照组相比,肝糖原(HG)、己糖激酶(HK)、果糖-6-磷酸激酶(FPK)、丙酮酸激酶(PK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)差异不显著。添加酵母铬与胆汁酸,肝脏脂蛋白脂酶(LPL)活力显著降低。 5、H.E.染色中,前肠试验组绒毛高度和面积增加。添加三丁酸甘油酯与胆汁酸,肌层厚度显著增加。后肠绒毛完整,没有肠腺,可观察到底部有分叉,试验组绒毛面积和肌层厚度显著升高,添加胆汁酸,显著增加绒毛高度。各个试验组的幽门盲囊绒毛高度和面积显著升高且更加完整,添加三丁酸甘油酯,肌层厚度显著降低。各组胃组织结构差异并不是很明显。添加酵母铬和三丁酸甘油酯,肝细胞核数量相对较多;添加胆汁酸,肝脏出现空泡。 扫描电镜图中,试验组前肠微绒毛排列得更加紧凑紧密。后肠微绒毛的形态结构很清晰,可以分辨出细胞上微绒毛的分布和形态,肠上微绒毛密集分布。胃粘膜表面有颗粒状的分泌物和食物残渣,各组差异并没有很明显。透射电镜中,肝脏细胞质中可见多种细胞器,有内质网和线粒体存在,内质网上可以清晰看到有核糖体,各组结构都很正常。添加胆汁酸后,可以看到内质网含量较多。 6、采用主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)与正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)方法进行血清代谢组学分析,发现添加三种饲料添加剂后,不同组别得到很好区分,同一组别聚类在一起。筛选出的差异代谢物主要是一些氨基酸、糖类、有机酸、胺类和核苷酸等。三丁酸甘油酯对甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、色氨酸代谢以及三磷酸腺苷结合盒(ABC)转运体产生了影响;胆汁酸则主要影响嘧啶代谢和ABC转运体。 结果表明:酵母铬、三丁酸甘油酯和胆汁酸均能够提高乌鳢生长性能。酵母铬影响蛋白质和糖脂代谢;三丁酸甘油酯改善肠道消化酶和抗氧化能力;胆汁酸主要影响脂类代谢,这三者均能改善肠道形态。采用代谢组学方法,筛选出了差异代谢物,说明这三种饲料添加剂对乌鳢代谢产生作用。