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共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,cLA)是一组功能性的具有18个碳原子、含有共轭双键的多不饱和脂肪酸,是必需脂肪酸一亚油酸(linoleic acid,LA)的异构体。研究发现:CLA具有减少脂肪沉积和影响脂类代谢、减少甘油三酯(TG)含量、防止动脉粥样硬化、抗氧化等多种生理功能。
本论文进行了两个方面试验。其一,通过日粮中添加不同水平的CLA研究了CLA对鹅的生长发育、脂类代谢及抗氧化功能的影响,并探讨其作用机理;其二,构建了肥胖大鼠模型,进行血液生化指标的检测及肝脏的病理切片,以及采用Western-Blot蛋白印迹法检测,并分析比较脂肪组织中瘦素(Leptin)和解偶联蛋白2(UCP2)的表达水平,来进一步探讨CLA抑制脂肪沉积的相关作用机制,以期为CLA对人类的保健作用提供依据。
试验一,选用1日龄健康、体重相近的鹅192只(公母各半)(P>0.05),按单因子完全随机设计分为4个处理,每个处理设4个重复共48只鹅,进行为期56天的饲养试验。4个处理组中CLA的添加量分别为0.0、5.0、15.0和25.0 g/kg(CLA油的纯度为80%)。具体分组情况如下:Ⅰ组(对照组):饲喂基础日粮(其中日粮中豆油的含量为2.5%,CLA油含量为0.00%);Ⅱ组(5.0 g/kg CLA添加组):以配比为0.5%CLA油替代基础日粮相应比例的豆油(其中日粮豆油的含量为2.0%,CLA油含量为0.5%):Ⅲ组(15.0 g/kg CLA添加组):以配比为1.5%CLA油替代基础日粮相应比例的豆油(其中日粮豆油的含量为1.0%,CLA油含量为1.5%);Ⅳ组(25.0 g/kg CLA添加组):以配比为2.5%CLA油替代基础日粮相应比例的豆油(其中日粮豆油的含量为0.0%;CLA油含量为2.5%)。
试验二,选用雌性Wistar大鼠55只,体重190±10g,随机分为正常对照组11只和造模组44只。造模组给予高脂、高糖饲料饲喂42天,经确定造模成功后(每组处死大鼠5只),按体重随机的原则分为4组(每组6只),其中三组CLA干预组:低剂量组(0.5 g/Kg·bw)、中剂量组(1.0 g/kg·bw)、高剂量组(3.0 g/kg·bw)和肥胖对照组[灌胃生理盐水1 ml/(kg·bw)]。正常对照组给予普通饲料,其余四组仍给予高脂、高糖饲料。35天后,处死全部大鼠。
主要研究结果如下:
1.在整个饲养阶段(0~8周龄),日粮CLA添加量不高于15.0 g/kg时,能够在不影响BWG的前提下显著降低鹅的采食量(FI),料重比(F/G)和腹脂率(AFP)(P<0.05);高剂量添加CLA(25.0 g/kg)能在不影响健康的前提下极显著地降低鹅的体重(BW)、FI和AFP(P<0.01)。
2.随着CLA添加水平的增加,胸肌、腿肌和腹脂中CLA的含量也显著增加(P<0.05),且三者中的C16:1/C16:0,C18:1/C18:0和总单不饱和脂肪酸(TMUFA)的含量降低,而总饱和脂肪酸(TSFA)含量显著升高(P<0.01);腿肌中总多不饱和脂肪酸(TPUFA)的含量显著下降(P<0.05);此外,日粮CLA添加量不高于15.0g/Kg时,显著降低血清TG、胆固醇(TC)、极低密度脂蛋白(VLDL)含量(P<0.05或P<0.01),增加高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量和高低密度脂蛋白胆固醇之比(HDL-C/LDL-C)(P<0.05)。由此表明,适宜添加CLA对鹅的脂质代谢具有很好的调节作用。
3.通过高脂高糖膳食诱导的肥胖大鼠模型试验表明,CLA通过增强卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)的活性,增加了HDL-C,并降低了LDL-C、TC、TG和动脉粥样硬化指数(AI),由此表明,CLA具有一定的调节血脂和抗动脉粥样硬化(AS)的作用;另外,Western Blot结果表明,CLA通过调节脂肪组织瘦素(Leptin)和解偶联蛋白2(UCP2)的表达,能够影响能量代谢和降低脂肪沉积。
4.日粮CLA添加水平为5.0g/kg,能够显著提高鹅血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性(6w、8w)和血清(6w)及肝脏组织中(8w)总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05);CLA添加水平为15.0 g/kg时,对鹅血清T-SOD,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)(6w、8w)活性及血清及肝脏T-AOC有一定提高作用;各CLA水平添加组均能不同程度地降低血清及肝脏中丙二醛(MDA)含量;说明CLA对鹅抗氧化功能的提高与脂质过氧化状况的改善具有一定调控作用。