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目的:柴油机尾气(diesel engine exhaust,DEE)暴露会损害肺功能,但其潜在机制仍不完全清楚。本研究的目的是探讨长期DEE暴露对肺部炎症的影响及机制。方法:8周龄Sprague-Dawley雄性大鼠暴露于柴油机尾气颗粒(diesel exhaust Particles,DEP)浓度为3mg/m~3的DEE中12周。收集大鼠的尿液、血液、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织。在体内,评估大鼠肺组织病理改变,检测尿液中多环芳烃代谢物(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs):2-羟基菲(2-hydro-xyphenanthrene,2-OHPh)、9-OHPh及氧化指标:8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)和丙二醛(malondialdehyde,MDA),检测血浆、BALF中炎症指标:IL-6、IL-8、TNF-α及肺损伤指标:CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding protein alpha,C/EBPα)、肺泡表面活性物质D(pulmonary surfactant protein D,SP-D)、克拉拉细胞分泌蛋白(clara cell secretory protein,CC16)的水平;同时,甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测肺组织中C/EBPα甲基化水平。体外大鼠肺上皮细胞系C22,DEP联合DAC(常用去甲基化药)刺激后检测细胞C/EBPα甲基化水平及C/EBPα、CC16等的表达;转染C/EBPαsiRNA评估CC16的表达;SRM1650b(柴油机颗粒物标准物质)联合CC16干预细胞后检测细胞炎症因子的表达。结果:DEE组大鼠尿液中2-OHPh、9-OHPh,8-OHdG和MDA含量均高于对照组。DEE组大鼠促炎因子IL-8、IL-6和TNF-α水平在血清(分别增加1.8、3.5和近1.0倍)、BALF(分别增加2.2、3.8和2.0倍)和肺组织(分别增加3.5、4.3和2.4倍)中均显著高于对照组。而DEE组大鼠CC16和SP-D水平在血清(分别降低29%和38%)、BALF(分别降低50%和46%)和肺组织(分别降低50%和55%)中明显低于对照组。且DEE暴露组大鼠的BALF中白细胞总计数,中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞数量显著增加并且气道炎症及重塑明显。C/EBPα启动子甲基化水平较对照组显著升高(增加约3.2倍),其mRNA和蛋白表达较对照组显著降低(分别降低约62%和68%)。通过进一步的细胞实验结果表明,DEP通过C/EBPα启动子甲基化抑制CC16的表达,而CC16水平的升高明显减轻了DEP的致炎作用。结论:长期DEE暴露会导致肺部炎症及损伤,可能是通过C/EBPα甲基化调控CC16表达实现的。