目的 肾上腺髓质素(ADM)是由52个氨基酸组成的血管活性多肽,属于降钙素基因相关肽(CGRP)家族,与多种组织的缺血再灌注损伤有关。有学者证实在中枢神经系统有ADM的表达,并与脑缺血再灌注损伤有一定关系。也有持相反意见的研究报道。所以我们选用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法、原位杂交组织化学法、逆转录—聚合酶链式(RT-PCR)分析方法等,验证正常大鼠脑组织是否有ADM及ADM mRNA的表达及具体表达的部位;观察ADM及ADM mRNA在局灶性缺血再灌注大鼠脑组织中的表达变化规律;探讨ADM对局灶性缺血再灌注大鼠神经元凋亡、梗死体积及Egr-1 mRNA的影响,进一步研究ADM在局灶性缺血再灌注脑损伤中的作用。 方法 健康雄性SD大鼠186只,体重200-250g,由中国医科大学实验动物中心提供。随机分为正常组(n=12),假手术组(n=12),局灶性脑缺血2h再灌注2h组(n=18)、4h组(n=18)、22h组(n=54)、46h组(n=18)、70h组(n=18)、118h组(n=18)、166h组(n=18)。其中再灌注22h组又分为:股静脉注射ADM组(n=12),颈内动脉注射ADM组(n=12),侧脑室注射ADM组(n=12)。采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,阻断血流2h进行再灌注。缺血再灌注各组大鼠在缺血2h再灌注4h时,参考Bederson等的5分制评分标准对其进行神经功能缺损评分,评分后分别制备石蜡切片和冰冻切片,TTC染色测定梗死体积,HE染色光镜下观察大鼠大脑皮质、海马的组织学变化,TUNEL法检测神经元凋亡,免疫组织化学法(SABC法)检测ADM阳性细胞表达,原位杂交法检测ADM mRNA