为探索黔北麻羊产多羔的分子机制,本研究以黔北麻羊为研究对象,检测SRD5A2、HSD3B1基因在性腺轴组织中表达水平及其对卵巢颗粒细胞的功能影响研究,探讨SRD5A2、HSD3B1基因对卵巢颗粒细胞调控的影响,运用qRT-PCR技术检测SRD5A2、HSD3B1基因在黔北麻羊性腺轴组织中的表达水平;采用免疫组化技术定位SRD5A2、HSD3B1蛋白在卵巢组织中的表达,分离培养原代卵巢颗粒细胞,构建了SRD5A2、HSD3B1基因的真核表达载体和RNA干扰载体并转染到卵巢颗粒细胞,Western blot检测目的基因蛋白的表达情况,检测SRD5A2、HSD3B1基因对繁殖相关基因、雌二醇和孕酮分泌、细胞增殖活性及增殖相关基因的影响。研究结果如下:1.qRT-PCR结果显示,黔北麻羊SRD5A2基因在多羔组子宫和卵巢组织中显著高表达于单羔组（P<0.05）,在单羔组垂体组织中极显著高表达于多羔组（P<0.01）;在输卵管和下丘脑组织中均有表达,但表达量没有达到差异显著水平。黔北麻羊HSD3B1基因在多羔组子宫和垂体组织中显著高表达于单羔组（P<0.05）,在多羔组卵巢组织中极显著高表达于单羔组（P<0.01）;在单羔组输卵管组织中显著高于多羔组（P<0.05）,在下丘脑中均有表达,但表达量没有达到差异显著水平。利用免疫组化法检测到SRD5A2、HSD3B1蛋白在卵巢颗粒细胞中均有表达。2.成功克隆了SRD5A2、HSD3B1基因CDS区,构建了pEGFP-N3-SRD5A2、pEGFP-N3-HSD3B1真核表达载体。生物信息学分析结果显示,SRD5A2蛋白的分子式为:C1230H1886N308O327S10;相对分子质量为:26.54097 k D,属碱性不稳定蛋白。HSD3B1蛋白的分子式为:C1940H3002N506O543S15;相对分子质量为:42.58314k D,属碱性不稳定蛋白。疏水性显示:SRD5A2蛋白为疏水蛋白,而HSD3B1蛋白为亲水蛋白。在SRD5A2蛋白中,无规则卷曲所占的比例最大,高达43.33%,在HSD3B1蛋白中,同样无规则卷曲所占的比例最大,高达38.34%。生物进化树显示,黔北麻羊SRD5A2、HSD3B1基因与牛的遗传距离最近,符合生物进化规律。3.成功转染pEGFP-N3-SRD5A2、pEGFP-N3-HSD3B1重组质粒到卵巢颗粒细胞,进一步检测雌激素、孕激素浓度发现,超表达HSD3B1基因在12h、24h、48h均可显著促进E2的生成（P<0.05）,在12h、24h、48h均可抑制P4的生成,其中24h达到差异显著水平（P<0.05）。细胞增殖活性（CCK-8）结果表明超表达SRD5A2、HSD3B1基因能够促进卵巢颗粒细胞的增殖,而抑制其凋亡,并且可以显著或极显著提高增殖相关CCND1、CDK4、PCNA基因表达（P<0.05或P<0.01）;更重要的是,超表达SRD5A2、HSD3B1基因发现,其对繁殖相关基因BMP15、BMPR-1B、GDF9、FSHB的m RNA表达具有显著或极显著促进作用（P<0.05或P<0.01）。4.完成了SRD5A2、HSD3B1基因干扰载体构建,并成功转染至卵巢颗粒细胞。CCK-8结果表明,干扰SRD5A2、HSD3B1基因可以抑制卵巢颗粒细胞的增殖,并且可以显著或极显著降低增殖相关CCND1、CCNE1、CDK4、PCNA基因表达（P<0.05或P<0.01）;干扰SRD5A2、HSD3B1基因后,其对繁殖相关基因BMP15、BMPR-1B、GDF9、FSHB的m RNA表达具有显著或极显著抑制作用（P<0.05或P<0.01）。综上所述,SRD5A2、HSD3B1基因参与调控卵巢细胞增殖和繁殖相关基因m RNA的表达,这些繁殖相关基因是山羊多羔性状的指标基因。因此,SRD5A2、HSD3B1基因可能通过调控细胞增殖和繁殖相关基因的表达,参与影响黔北麻羊繁殖性能,初步认为SRD5A2、HSD3B1基因可以作为探究影响山羊繁殖性状的候选基因。