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目的探讨NS-398对食管癌细胞系Eca-109是否具有放射增敏作用。同时采用流式细胞仪分析Eca-109细胞在X线照射后单纯放射组与联合NS-398组中SP细胞及β-catenin的含量,通过对差异的分析,进一步探讨NS-398对食管癌细胞系Eca-109的放射增敏机制,并分析其对食管癌干细胞增殖的影响。这些将为肿瘤的放射治疗奠定一定的理论基础。方法采用MTT比色实验法检测NS-398(以40μmol/L的浓度对食管癌细胞Eca-109细胞作用24小时)联合0、2、4、6、8Gy的X线照射对食管癌细胞的增殖抑制率的影响。采用流式细胞仪检测各照射剂量的单纯照射组及联合NS-398的照射组中的SP细胞比例的变化情况;同时采用流式细胞仪检测各照射剂量的单纯照射组及联合NS-398的照射组中干细胞表面标志物β-catenin蛋白含量的变化情况。结果1. NS-398对Eca-109细胞的增殖抑制率的影响:NS-398(以40μmol/L的浓度作用24小时)联合0、2、4、6、8Gy照射剂量的5组细胞在24小时的生长抑制率分别为31.7%、42.5%、54.1%、57.5%、63.8%;48小时的生长抑制率分别为44.7%、45.4%、53.9%、60.9%、65.9%;72小时的生长抑制率分别为45.1%、53.3%、64.2%、64.8%、63.4%。结果提示:随着放射剂量的增大食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用也呈增加趋势,并且随着照射后生长时间的延长生长抑制作用也呈增加趋势。2.侧群细胞比例分析BD LSRⅡ流式仪分析结果显示:给予0、2、4、6、8GyX线照射后,联合NS-398的照射组中SP细胞的比例分别为0.6%、1.9%、4.6%、5.8%、6.7%;而单纯照射组中SP细胞的比例分别为1.5%、6.3%、6.4%、8%、10%。结果提示:随着照射剂量的增加,各组中SP细胞的含量呈增加趋势,联合NS-398的照射组与单纯照射组相比,经不同剂量的射线照射后SP细胞的含量均有不同程度的减少。3.干细胞标记物β-catenin的比例分析BD LSRⅡ流式仪分析结果显示:给予0、2、4、6、8Gy X线照射后,联合NS-398的照射组中β-catenin的含量分别为0.2%、3.4%、11.2%、14.7%、21.6% ,而单纯照射组中β-catenin的含量分别为1.4%、7.2%、19.1%、22.7%、24.4%。结果提示:随着放射剂量的增大,各组中β-catenin的含量呈增加趋势;而联合NS-398的照射组与单纯照射组相比,经不同剂量的射线照射后各组中β-catenin蛋白的含量均有不同程度的减少。结论Eca-109细胞的生长抑制程度与X射线的照射剂量呈正相关性。NS-398能够增强食管癌Eca-109细胞的放射敏感性,其放射增敏机制与抑制食管癌干细胞及调节Wnt/β-catenin信号通路有关;而NS-398最终作用于该通路的哪些环节值得做进一步的研究;本实验的结果为选择性COX-2抑制剂作为食管癌放疗增敏剂的进一步研究提供了一定的理论依据。